[发明专利]一种定量检测血清中尿酸的方法

说明书

本发明公开了一种定量检测血清中尿酸的方法，属于血清中尿酸检测技术领域，包括以下步骤：向待检测的血清中加入尿酸酶且混合均匀，得到混合液A，向混合液A中加入三聚氰胺氰尿酸盐和钯纳米粒子形成的复合物得到混合液B；向混合液B中加入2，2‑联氮‑二(3‑乙基‑苯并噻唑‑6‑磺酸)二铵盐得到混合液C；S4：将混合液C置于37℃的恒温环境中15～25min进行育温，然后室温环境内静置8～12min，得到混合液D；测定混合液D在420nm处的吸光度值，将测定得到的吸光度值带入标准曲线得到的计算公式，计算出尿酸的浓度；对血清中尿酸的浓度进行定量检测，使检测体系简单化同时减少影响因素，降低试剂成本。

技术领域

本发明属于血清中尿酸检测技术领域，具体涉及一种定量检测血清中尿酸的方法。

背景技术

目前临床上常用于血清尿酸检测的方法主要是尿酸酶-过氧化物酶偶联法，其实验原理为：尿酸可被尿酸酶氧化，生成尿囊素和过氧化氢，在过氧化物酶催化下，过氧化氢使3，5-二氯-2-羟苯磺酸(DHBS)和4-氨基安替比林(4-AAP)缩合成红色醌类化合物，在520nm波长处有最大吸光度，其吸光度值与尿酸含量成正比；该方法中采用的过氧化物酶为天然的蛋白酶，如辣根过氧化物酶等，被广泛应用于各种临床检测方法中，但是由于天然的蛋白酶具有性质不稳定、在生物体内的含量较低、提纯以及储存较困难等等缺点，如在过酸、过碱以及高温条件下容易失活，这也使得天然酶的使用条件变得苛刻，窄范围的使用条件限制了它的实际应用。

发明内容

为了解决现有技术存在的上述问题，本发明提供了一种定量检测血清中尿酸的方法。

本发明所采用的技术方案为：一种定量检测血清中尿酸的方法，包括以下步骤：

S1：向待检测的血清中加入尿酸酶且混合均匀，得到混合液A；

S2：向混合液A中加入三聚氰胺氰尿酸盐和钯纳米粒子形成的复合物且混合均匀，得到混合液B；

S3：向混合液B中加入2，2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐且混合均匀，得到混合液C；

S4：将混合液C置于37℃的恒温环境中15～25min进行育温，然后室温环境内静置8～12min，得到混合液D；

S5：测定混合液D在420nm处的吸光度值；

S6：将测定得到的吸光度值带入标准曲线得到的计算公式，计算出尿酸的浓度。

三聚氰胺氰尿酸盐和钯纳米粒子形成的复合物简写为：MCA-Pd NPs；2，2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐简写为：ABTS^2-；

本发明的有益效果为：采用三聚氰胺氰尿酸盐和钯纳米粒子形成的复合物，在三聚氰胺氰尿酸盐和钯纳米粒子形成的复合物加入之后，就只需要加入2，2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐，代替原有的3，5-二氯-2-羟苯磺酸和4-氨基安替比林，对血清中尿酸的浓度进行定量检测，使检测体系简单化同时减少影响因素，降低试剂成本和使用范围扩大，具有实际意义，为临床检测应用奠定坚实的基础，为临床血清尿酸检测方法研究寻找到一个新的方向。

本发明的工作原理为：尿酸被尿酸酶氧化，生成尿囊素和H₂O₂，H₂O₂在MCA-Pd NPs的作用下产生O₂，O₂将底物ABTS^2-氧化成为显绿色的自由基ABTS^·-，因此液体由无色转变成绿色，在420nm波长处有最大吸光度，其吸光度值与尿酸含量成正比。

进一步限定，步骤S6中计算公式由以下步骤得到：

A1：参考尿酸浓度的临床检测范围，设定6个的工作标准液，每个工作标准液的浓度均不相同；