[发明专利]一株三唑酮单克隆抗体杂交瘤细胞株B11S及其应用

权利要求书

1.一株三唑酮单克隆抗体杂交瘤细胞株B11S，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，分类命名为单克隆细胞株，保藏日期2019年10月14日，保藏编号CGMCC No.18518。

2.三唑酮单克隆抗体，其特征在于：它由权利要求1所述保藏编号为CGMCC No.18518的三唑酮单克隆抗体杂交瘤细胞株B11S分泌产生。

3.三唑酮半抗原的合成，其特征在于步骤为：将氯乙酸钠和无水碳酸钠在2mL纯水中溶解得到溶液A，将三唑酮的结构类似物三唑醇在质量浓度为95%的乙醇中溶解得到溶液B；然后将A液缓慢加入B液中，在室温下搅拌10h，得到C液；将反应物过滤，滤液在80℃水浴中蒸发至干燥，然后将沉淀物TDF贮存在4℃下使用。

4.三唑酮完全抗原的合成，其特征在于步骤为：

（1）免疫原TDF-BSA的制备：称取6.3mg TDF，1-乙基碳二亚胺盐酸盐10.3mg，N-羟基琥珀酰亚胺6.2mg，用400μL无水N,N-二甲基甲酰胺溶解，室温搅拌反应6h，称为A液；取牛血清白蛋白BSA 10mg，加入3mL硼酸缓冲溶液，称为B液，在室温条件，将A液缓慢加入到B液中，室温搅拌反应过夜，即得偶联物TDF-BSA混合液，通过透析分离完全抗原和未偶联的小分子；

（2）包被原TDF-OVA的制备：称取2.4mg TDF，1-乙基碳二亚胺盐酸盐3.9mg，N-羟基琥珀酰亚胺2.4mg，用300μL无水N,N-二甲基甲酰胺溶解，室温搅拌反应6h，称为C液；称取10mg鸡卵白蛋白OVA，溶解于2mL硼酸缓冲溶液中，称为D液；在室温条件下，将C液逐滴加入到D液中，室温搅拌反应过夜，即得偶联物TDF-OVA混合液，通过透析分离完全抗原和未偶联的小分子。

5.权利要求2所述三唑酮单克隆抗体的应用，其特征在于：用于食品安全检测中三唑酮残留的分析检测。