[发明专利]一种春兰CgWRKY4基因及其应用

说明书

本发明公开了一种春兰CgWRKY4编码基因及其应用，CgWRKY4基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其表达蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明通过对春兰栽培品种‘宋梅’CgWRKY4基因的克隆与鉴定，基因表达分析，并验证其功能，发现CgWRKY4转基因拟南芥在幼苗期，与野生型拟南芥WT相比，CgWRKY4转基因植株叶片偏小且微黄，花期推迟，说明基因可能抑制了植株的营养生长，导致营养缺乏而延迟开花，可见该基因可能在兰花花性状改良方面有广泛的用途。

技术领域

本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种春兰CgWRKY4基因及其应用。

背景技术

兰科（Orchidaceae）是开花植物中最大科之一，全世界含有25000多种，约占所有开花植物的10%。春兰（Cymbidium goeringii）属于兰科兰属中的小花型地生兰种类，其花型奇特、花色淡雅，花香清幽，叶姿优美，观赏价值和经济价值极高。春兰对生长环境要求较高，在生长过程中极易受到高温、低温、干旱等恶劣环境影响，严重时，会导致园艺观赏品质下降，甚至植株死亡。因此，研究植物应对非生物胁迫的分子机制以及鉴定具有抗逆功能的基因对春兰育种和生产具有重要意义。在植物细胞信号转导途径中，WRKY转录因子被认为是植物生长和多种胁迫响应的关键枢纽，为植物的遗传改良提供重要依据。

WRKY转录因子是植物中最大的调节蛋白家族之一，参与多种生理过程，其中，最突出的是对生物和非生物胁迫的应激反应。有报道表明WRKY基因可以增强植株对逆境胁迫的耐受性。向日葵HaWRKY76转基因植株对水涝胁迫表现出更强的抗逆性，产量也明显增多。AtWRKY25的过表达增强拟南芥的耐盐性。AtWRKY57在水稻中的过表达不仅提高了水稻的抗旱性，而且增强了其对盐和PEG的耐受性。因此，利用基因工程技术，从春兰中克隆获得CgWRKY4基因，该基因在ABA胁迫下存在明显的表达差异，因此将CgWRKY4基因转入植物中，极具应用前景。

不同的植物，即使是相同的基因族，基因序列也是不同的，即使是80%以上的基因序列相同，但是因为部分基因插入的位点不同，将其转入植物中，所起到的作用也是不同的。当外源基因进入染色体上，产生了此基因编码的外源蛋白，外源蛋白或酶通过一系列的反应导致了其他酶或蛋白质活性的增强或者降低，另外当外源基因嵌入在染色体的某个区段时，必将对整个染色体产生影响，从而影响其他基因的活性或调控机制。

即使插入的是同一个基因，但是由于插入位点不同或者染色体组不同，必然对所在染色体产生影响，进一步导致对所在染色体上的基因产生影响，而基因微小的改变，都有可能影响其调控机制，导致出现基因失活、活性降低、活性增强等改变，也造成基因作用的不同，而基因的作用需要通过验证才能获得，并不是通过推断就能得到。

发明内容

发明目的：针对现有育种技术中存在的不足，本发明的目的是提供一种春兰CgWRKY4基因。本发明的另一目的是提供春兰CgWRKY4基因在兰花育种中的应用。

技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下：

一种春兰CgWRKY4基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

所述的春兰CgWRKY4基因的表达蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

所述的春兰CgWRKY4基因在植物生产和育种中的应用。