[发明专利]靶向HLA-B的嵌合抗原受体、编码基因、CAR-Tregs细胞及其制备方法、用途

说明书

本发明公开一种靶向HLA‑B的嵌合抗原受体、编码基因、重组表达载体、CAR‑Tregs细胞及其制备方法、用途，所述嵌合抗原受体包括信号肽、抗原结合结构域、铰链区、跨膜区、共刺激因子和胞内信号传导域；所述抗原结合域为抗HLA‑B13抗体、抗HLA‑B15抗体、抗HLA‑B46抗体和抗HLA‑B58抗体的结合结构域中的任意一种，本发明CAR‑Tregs细胞为靶向HLA‑B的嵌合抗原受体修饰的Treg细胞，可抑制特异性免疫反应，可用于实体器官移植术后排斥反应的抑制。

技术领域

本发明涉及分子基因技术领域，具体涉及一种靶向HLA-B的嵌合抗原受体、编码基因、重组表达载体、CAR-Tregs细胞及制备方法、用途。

背景技术

我国现存大约有30万实体器官移植受者，其术后有面临排斥反应的巨大风险。现阶段免疫抑制剂的使用虽然可以有效降低排斥风险，提高移植物存活率，但由于其是降低机体整体免疫功能，特异性不高，因此导致肿瘤、感染等发病风险增高。同时，由于免疫抑制剂均具有一定的药物毒性，长期使用容易引发一些慢性疾病，如慢性肾损伤，高尿酸血症等。

发明内容

有鉴于此，本申请提供一种靶向HLA-A的嵌合抗原受体、编码基因、重组表达载体、CAR-Tregs细胞及其制备方法、用途，本发明CAR-Treg细胞为靶向HLA-B的嵌合抗原受体修饰的Treg细胞，可抑制特异性免疫反应，可用于实体器官移植术后排斥反应的抑制。

为解决以上技术问题，本申请提供的技术方案是一种靶向HLA-B的嵌合抗原受体，所述嵌合抗原受体包括信号肽、抗原结合结构域、铰链区、跨膜区、共刺激因子和胞内信号传导域；所述抗原结合域为抗HLA-B13抗体、抗HLA-B15抗体、抗HLA-B46抗体和抗HLA-B58抗体的结合结构域中的任意一种。

优选的，所述抗HLA-B13抗体为靶向HLA-B13的单链抗体，其包括串联的HLA-B13单链抗体重链VH、HLA-B13单链抗体轻链VL；HLA-B13单链抗体重链VH位于所述靶向HLA-B13的单链抗体的N端，HLA-B13单链抗体轻链VL位于靶向所述HLA-B13的单链抗体的C端；HLA-B13单链抗体重链VH氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，HLA-B13单链抗体轻链VL氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示；

所述抗HLA-B15抗体为靶向HLA-B15的单链抗体，其包括串联的HLA-B15单链抗体重链VH、HLA-B15单链抗体轻链VL；HLA-B15单链抗体重链VH位于所述靶向HLA-B15的单链抗体的N端，HLA-B15单链抗体轻链VL位于靶向所述HLA-B15的单链抗体的C端；HLA-B15单链抗体重链VH氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，HLA-B15单链抗体轻链VL氨基酸序列如SEQ IDNO.4所示；

所述抗HLA-B46抗体为靶向HLA-B46的单链抗体，其包括串联的HLA-B46单链抗体重链VH、HLA-B46单链抗体轻链VL；HLA-B46单链抗体重链VH位于所述靶向HLA-B46的单链抗体的N端，HLA-B46单链抗体轻链VL位于靶向所述HLA-B46的单链抗体的C端；HLA-B46单链抗体重链VH氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，HLA-B46单链抗体轻链VL氨基酸序列如SEQ IDNO.6所示；

所述抗HLA-B58抗体为靶向HLA-B58的单链抗体，其包括串联的HLA-B58单链抗体重链VH、HLA-B58单链抗体轻链VL；HLA-B58单链抗体重链VH位于所述靶向HLA-B58的单链抗体的N端，HLA-B58单链抗体轻链VL位于靶向所述HLA-B58的单链抗体的C端；HLA-B58单链抗体重链VH氨基酸序列如SEQ ID NO.7所示，HLA-B58单链抗体轻链VL氨基酸序列如SEQ IDNO.8所示；