[发明专利]促进神经再生的活性多肽在材料表面共价接枝的方法及其应用

权利要求书

1.一种促进神经再生的活性多肽在材料表面共价接枝的方法，为促进神经再生的多肽共价接枝到生物材料表面的体系，包括改性天然生物材料支架，促进神经再生多肽及多肽共价连接到生物材料支架，其特征在于：所述方法为通过硫醇-烯反应的多肽多肽接枝方法，具体操作如下：

步骤一、天然生物材料支架的制备：将生物相容性的天然多糖或蛋白质溶解，冷冻干燥，经酸碱或乙醇变性处理得到天然生物材料支架；

步骤二、甲基丙烯酰基改性的生物材料的制备：天然生物材料支架的羟基与3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷发生反应得到甲基丙烯酰基改性的生物材料；

步骤三、生物活性多肽的合成：首先通过计算机模拟筛选出一系列多肽，多肽的合成按照多肽固相合成的方法制备：以2-氯三苯甲基氯树脂和Fmoc保护的氨基酸为起始原料，使用HBTU进行氨基酸之间酰胺键的缩合，最后经三氟乙酸从树脂上切下多肽并除去保护基，经高效液相色谱纯化得到这些生物活性多肽；

步骤四、多肽改性的生物材料的制备：将含生物活性多肽的水溶液加入甲基丙烯酰基改性的生物材料的溶液中，多肽中的巯基就会与生物材料表面的甲基丙烯酰基发生硫醇-烯反应，得到定量高效制备的多肽改性的生物材料。

2.根据权利要求1所述的促进神经再生的活性多肽在材料表面共价接枝的方法，其特征在于：所述的天然多糖是壳聚糖或海藻酸；所述的蛋白质是丝素蛋白或胶原；所述的酸碱或有机醇是盐酸，硫酸，氢氧化钠，氢氧化钾或乙醇。

3.根据权利要求2所述的促进神经再生的活性多肽在材料表面共价接枝的方法，其特征在于：所述的壳聚糖溶解在乙酸的水溶液中，冷冻干燥，经氢氧化钠或氢氧化钾处理，与3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷反应得到甲基丙烯酰基改性的壳聚糖。

4.根据权利要求2所述的促进神经再生的活性多肽在材料表面共价接枝的方法，其特征在于：所述的海藻酸溶解在氢氧化钠的水溶液中，冷冻干燥，经盐酸或硫酸处理，与3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷反应得到甲基丙烯酰基改性的海藻酸。

5.根据权利要求2所述的促进神经再生的活性多肽在材料表面共价接枝的方法，其特征在于：所述的胶原溶解在乙酸的水溶液中，冷冻干燥，经弱碳酸氢钠水溶液中和，与3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷反应得到甲基丙烯酰基改性的胶原。

6.根据权利要求2所述的促进神经再生的活性多肽在材料表面共价接枝的方法，其特征在于：所述的丝素蛋白溶解在溴化锂或氯化钙/乙醇的水溶液中，冷冻干燥，经弱碳酸氢钠水溶液中和，与3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷反应得到甲基丙烯酰基改性的丝素蛋白。

7.根据权利要求1所述的促进神经再生的活性多肽在材料表面共价接枝的方法，其特征在于：所述的3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷的浓度为0.001％-50％甲醇或乙醇溶液中的一种或两种。

8.根据权利要求1所述的促进神经再生的活性多肽在材料表面共价接枝的方法，其特征在于：所述的生物活性多肽是具有促进神经再生的多肽CRSYIG，CRSYIG-Biotin，CGQRKDP，CGQRKDP-Biotin，CFKIDKK，CFKIDKK-Biotin中的一种或多种。

9.根据权利要求1所述的促进神经再生的活性多肽在材料表面共价接枝的方法，其特征在于：所述的生物活性多肽的水溶液可以是水溶液、磷酸盐缓冲溶液、细胞培养液或生理盐水中的一种或多种。

10.一种根据权利要求1所述的促进神经再生的活性多肽在材料表面共价接枝的方法的应用，其特征在于：本发明制备的多肽修饰的方法可以用于心脑血管，骨组织工程，神经组织工程以及皮肤组织工程的领域。