[发明专利]一种响应面法优化酶解辅助超声提取艾叶总黄酮的方法

说明书

本发明涉及中药提取技术领域，尤其是一种响应面法优化酶解超声辅助提取艾叶总黄酮的方法，包括以下步骤：(1)原料处理：将艾叶干燥、粉碎，制得艾叶粉末；(2)酶解：向阿艾叶粉末中加入酶、缓冲液进行酶解，利用响应面法优化的酶解工艺条件，酶解过后，液过滤，获得滤渣和酶解滤液；(3)提取：滤渣中加入乙醇超声提取，获得醇提取液；(4)浓缩干燥。本发明通过对艾叶进行酶解辅助超声法提取，并对提取过程中的酶用量、酶解pH值、酶解时间、酶解温度等工艺参数进行合理的确定和选择，使得艾叶总黄酮产率高达10.99mg/g以上，超声提取时间为20min。达到了高效提取艾叶总黄酮的目的。

技术领域

本发明涉及中药提取技术领域，尤其是一种响应面法优化酶解超声辅助提取艾叶总黄酮的方法。

背景技术

艾叶为菊科植物艾(Artemisia argyi Lévl.Et Vant)的干燥叶，具有温经止血、散寒止痛、祛湿止痒的功效。艾叶中含挥发油、倍半萜类及黄酮类化合物等成分，其中黄酮类是主要活性物质。药理研究表明艾叶黄酮类成分具有清除自由基、抗氧化、抗衰老、抗癌防癌等作用。

植物细胞由纤维素、果胶等成分构成的致密结构，阻碍溶剂的渗透和有效成分的释放。而酶具有专一性，故可针对细胞壁成分，选用适宜的酶，使细胞壁产生局部疏松、膨胀、崩溃等变化，从而降低有效成分从细胞内向提取介质扩散的阻力，提高溶出效率。超声波技术是利用超声空化作用引起的湍动效应、微波效应、界面效应、聚能效应等，产生的强大剪切力能使植物细胞壁破裂，使细胞更容易释放内容物，同时促进溶剂进入提取物细胞，加速成分进入溶剂。

响应面法是工艺优化常用的有效方法。响应面法是以非线性拟合的回归方程为函数计算的工具，对函数的面进行分析，研究因子与响应值之间、因子与因子之间的相互关系，并进行优化。它是一种优化反应条件和工艺参数的有效方法。正交设计法可同时考虑多种因素，寻求最佳因素组合，但是无法找到整个区域上因素的最佳组合和响应值的最优值。响应面法克服了正交设计只能处理离散的水平值，而无法找出整个区域上因素的最佳组合和响应值的最优值。

目前，酶辅助提取、超声辅助提取、响应面法已被研究用于艾叶黄酮提取技术。如文献《响应曲面法优化超声波辅助提取艾叶中总黄酮的工艺研究》(山西化工，2018)中以艾叶为原料，采用单因素实验与相应曲面分析法相结合，研究了超声辅助提取艾叶中总黄酮的影响因素及最佳工艺条件。结果表明，超声辅助提起艾叶中总黄酮的最佳工艺条件为：乙醇体积分数60％，提取时间为60min，液固比为20:1(mL/g),提取温度为40℃,艾叶中总黄酮的提取率为9.15％。

又如公开号为CN107595915A专利中公开了一种艾草提取物的生产方法：先将新鲜艾叶切碎匀浆，加入纤维素酶粉酶解，制得酶解液；然后将酶解液经水蒸气蒸馏提取、过滤、第一次喷雾干燥处理，制得艾叶油粗提液(馏出液)、蒸馏液、滤出液、原料粗粉，原料粗粉经醇提、抽滤、超滤、第二次喷雾干燥处理制得艾草黄酮提取物粗粉；再将艾草黄酮粗粉经AB-8大孔树脂吸附、第三次喷雾干燥，制得艾草黄酮提取物干粉。

上述文献或专利都是采用单独的酶法辅助提取法、超声辅助提取法提取艾叶中的总黄酮。目前将酶法—超声辅助提取艾叶总黄酮的研究尚未见报道；本研究者对酶法和超声法结合应用于艾叶总黄酮提取进行探索，为艾叶总黄酮提取提供了一种新思路。

发明内容

本发明的目的在于提供一种响应面法优化酶解辅助超声提取艾叶总黄酮的方法，与现有技术相比，大大缩短了提取时间，提高了提取效率。

具体通过以下技术方案实现的：

一种响面法优化酶解辅助超声提取艾叶总黄酮的方法，包括以下步骤：

(1)原料处理：将艾叶干燥、粉碎，制得艾叶粉末；

(2)酶解：向阿艾叶粉末中加入酶、缓冲液进行酶解，利用响应面法优化的酶解工艺条件，酶解过后，液过滤，获得滤渣和酶解滤液；