[发明专利]一种DSE菌剂制备及其施用方法与共生效应敏感期监测

说明书

本发明提供了一种DSE菌剂制备及其施用方法与共生效应敏感期监测。本发明提供的格孢菌Pleosporales sp.针A2‑8，其保藏编号为CGMCC No.18812。本发明还提供了为固态菌剂，其按照包括如下步骤的方法制备：1)将所述格孢菌接入液体培养基中培养，得到培养液；2)过滤培养液，收集固态物质，得到菌剂。本发明的实验证明，本发明提供了一种新菌株及其制备的固态菌剂，将其施用于于植物，促使该菌与植物达成共生关系，使该菌对植物的促生长效应达到最大化，找到菌与植物侵染共生体形成的过程，其共生敏感时段的监测。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种DSE菌剂制备及其施用方法与共生效应敏感期监测。

背景技术

深色有隔内生真菌(Dark Septate Endophytes，DSE)是一类可以与绝大多数植物根系形成互利共生关系的土壤真菌，其菌丝颜色较深，具有明显横隔。已有研究表明，DSE具有促进宿主植物吸收矿质营养、促进宿主植物对有机养分的吸收、提高宿主植物的抗逆性和提高宿主的抗病能力的生态功能，其在植物-微生物-土壤三位一体的生态系统中发挥着重作用。目前，DSE菌剂限于实验室生产，所消耗人力、物力较大，生产成本较高；为实现其合理化施用，最大化发挥其对植物的作用效益，研究DSE菌剂的固体新鲜菌剂制备方法。

另外DSE菌剂接入土壤植物根系，开始发挥其作用，与植物建立共生关系，促进植物生长，确定出DSE与植物形成共生关系后对促进植物生长的敏感期，对于野外监测最佳时间的选择具有重要意义。

发明内容

本发明一个目的是提供一株新菌株。

本发明提供的格孢菌Pleosporales sp.针A2-8，其保藏编号为CGMCC No.18812。

本发明第二个目的是提供一种菌剂。

本发明提供的菌剂，为固态菌剂，其按照包括如下步骤的方法制备：

1)将上述格孢菌接入液体培养基中培养，得到培养液；

2)过滤培养液，收集固态物质(呈团状粘稠物质)，得到菌剂。

上述菌剂中，所述培养的时间为4-6天。

上述菌剂中，所述培养条件为25-28℃、160-180r/min振荡培养。

上述菌剂中，所述过滤采用中速滤纸；

或，所述液体培养基为液体MMN培养基。

上述菌剂中，将所述格孢菌接入液体培养基为将所述格孢菌的菌丝体接入液体培养基；

所述格孢菌的菌丝体按照如下方法制备：

a)将所述格孢菌在固体培养基中培养至布满菌丝体；

b)再从布满菌丝的培养基上取菌片接入所述液体培养基中培养；

上述菌剂中，所述菌片的直径和所述液体培养基的配比为1mm：25-35ml；具体为所述菌片的直径和所述液体培养基的配比为1mm：30ml；

在本发明的实施例中，具体采用菌片的直径为5mm；液体培养基体积为150ml。

上述菌剂中，所述得到的培养液浓度为每ml培养液所含DSE干物质的量为4.5-8.7mg。

本发明的实施例中，所述在固体培养基中培养的条件为25-28℃恒温倒置培养7-10天；采用的固体培养基为PDA培养基。

上述格孢菌或上述菌剂在如下1)-5)中至少一种中的应用也是本发明保护的范围内：

1)促进植物生长；

2)促进植物在贫瘠土壤中生长；