[发明专利]一种污泥源头减量菌株的分离筛选方法

权利要求书

1.一种污泥源头减量菌株的分离筛选方法，包括菌株的分离和菌株的进一步筛选，其特征在于：

菌株的分离包括如下步骤：1）取污水处理厂新鲜的污泥装入玻璃容器中并封口；2）将封口后的玻璃容器放入摇床中摇床培养一周，去掉1/2原污泥，加入同体积的新鲜污泥；3）重复步骤2）6~10次后，再摇床培养一周获得驯化后的活性污泥；4）选取驯化后的活性污泥的上清液，进行梯度稀释后涂布于含有污泥的灭菌琼脂平板培养基上，37℃倒置培养20~24h后，选取菌落周围有透明圈的菌株进行平板划线纯化，直至得到纯菌；5）将纯菌转移至固体LB培养基上培养20~24小时，并用甘油冻存法保存菌种于-80℃中；

菌株的进一步筛选包括如下操作：取分离出的纯菌，分别活化到LB培养基上，取同一生长期的菌株，控制投加的量一致，投入到含有污泥的玻璃容器中，常温下进行摇床实验，每隔固定的时间取样与不投菌株的样品作对比并记录数据，根据数据作图得出优势菌株。

2.根据权利要求1所述的污泥源头减量菌株的分离筛选方法，其特征在于：还包括后续筛选步骤：将进一步筛选后获得的多种优势菌株进行组合来和单菌的投加做比较得出最优菌株；最优菌株投入污泥中优化最佳污泥去率的温度、pH、时间条件，在最佳条件下探讨菌株使得污泥减量的机理，包括酶、抗生素、胞外聚合物的检测。

3.根据权利要求1所述的污泥源头减量菌株的分离筛选方法，其特征在于：所述玻璃容器为锥形瓶。

4.根据权利要求1所述的污泥源头减量菌株的分离筛选方法，其特征在于：步骤2）和步骤3)摇床培养条件均为29~31℃、50~70转/分钟。

5.根据权利要求1所述的污泥源头减量菌株的分离筛选方法，其特征在于：步骤2）和步骤3）中可以调节污泥pH值及摇床温度以定向筛选特殊菌株。

6.根据权利要求1所述的污泥源头减量菌株的分离筛选方法，其特征在于：步骤4）中所述含有污泥的灭菌琼脂平板培养基的制备方法为：50 g离心污泥，300 mL无菌水，4.5 g琼脂混匀后装在500 mL锥形瓶中并置于高压灭菌锅灭菌，灭菌之后在超净台里倒置污泥平板。

7.根据权利要求1所述的污泥源头减量菌株的分离筛选方法，其特征在于：

步骤4）中进行梯度稀释的梯度为10^-6、10^-7、10^-8、10^-9、10^-10、10^-11、10^-12。

8.根据权利要求1所述的污泥源头减量菌株的分离筛选方法，其特征在于：通过菌株的分离后获得纯菌包括芽孢杆菌属纯菌。