[发明专利]一种两歧双歧杆菌抗肿瘤制剂的制备方法及其产品和应用

权利要求书

1.一种两歧双歧杆菌抗肿瘤制剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)培养两歧双歧杆菌至其生长对数期，通过离心收集两歧双歧杆菌，然后将两歧双歧杆菌重悬于磷酸盐缓冲液，制得重悬液I；

2)将壳聚糖溶于重悬液I，置于摇床中共孵，然后离心，收集沉淀，将沉淀重悬于磷酸盐缓冲液，制得重悬液II；

3)利用水相合成法制备含有量子点的水溶液；含有量子点的水溶液中的量子点为硫化银量子点；

4)将步骤2)制得的重悬液II和步骤3)制得的含有量子点的水溶液共孵，然后离心，收集沉淀，向沉淀中加入去离子水重悬挥干，制得两歧双歧杆菌抗肿瘤制剂；

步骤3)中，含有量子点的水溶液的制备方法包括如下步骤：

1)将GSH溶解于脱氧去离子水中，然后添加AgNO₃，使用NaOH溶液调节pH，制得反应液I，

2)在剧烈搅拌条件下将Na₂S溶于脱氧去离子水中，制得反应液II；

3)将反应液II缓慢地添加至反应液I中，再次调节pH，制得反应液III；

4)将反应液III加热至95℃并在该温度下保持3小时，然后冷却至室温，离心浓缩，制得含有硫化银量子点的水溶液。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中的两歧双歧杆菌，保藏号为CGMCC 1.2212。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤1)中，两歧双歧杆菌的培养基为MRS，培养时间为48-72h；离心收集过程中，转速为3500-4000rpm，离心温度为4℃；对数生长期OD值为0.6-0.8；重悬液I的短期保存温度为2-8℃；在抗冻剂甘油保护下，重悬液I的长期保存温度为-20℃或-80℃。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤2)中，共孵的条件为：转速200-220rpm，温度37℃，共孵时间30-45min；离心的条件为：转速3500-4000rpm，温度4℃，离心时间10-15min，离心次数2-4次。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述含有硫化银量子点的水溶液中硫化银量子点的浓度为：0.25-1mg/mL。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤4)中，共孵的条件为：转速200-220rpm，温度37℃，共孵时间30-45min；离心的条件为：转速3500-4000rpm，温度4℃，离心时间10-15min，离心次数2-4次。

7.根据权利要求1-6任一项所述的制备方法制得的两歧双歧杆菌抗肿瘤制剂。