[发明专利]含有重组蛋白和保护蛋白的复合物在治疗肺鳞癌中的应用

说明书

本发明提出了含有重组蛋白和保护蛋白的复合物在治疗肺鳞癌中的应用，所述重组蛋白包括：上皮细胞黏附分子抗体片段；腺病毒受体免疫球蛋白样细胞黏附分子的胞外区片段；以及T4噬菌体Fibritin片段，所述T4噬菌体Fibritin片段的两端分别连接所述上皮细胞黏附分子抗体片段和腺病毒受体免疫球蛋白样细胞黏附分子的胞外区片段；所述保护蛋白包括：腺病毒表面蛋白Hexon抗体片段；以及T4噬菌体Fibritin片段，所述T4噬菌体Fibritin片段与所述腺病毒表面蛋白Hexon抗体片段相连。本发明的复合物既可以特异性识别肺鳞癌细胞，提高感染肺鳞癌细胞效率，也可以降低机体对腺病毒的免疫反应，从而实现腺病毒基因编辑治疗，为肺鳞癌治疗提供了科学研究和临床应用基础，应用前景好。

技术领域

本发明涉及生物医药领域。具体地，本发明涉及含有重组蛋白和保护蛋白的复合物在治疗肺鳞癌中的应用。

背景技术

肺癌在世界范围内都是致死率较高的肿瘤类型，其中肺鳞癌占肺癌诊断病例的30％。肺鳞癌好发于男性，与吸烟密切相关。我国是全球吸烟人数最多的国家，亦是肺鳞癌患者最多的国家。肺鳞癌常在肺部中央发病，确诊时多为晚期，手术难度大，预后效果较差。肺鳞癌通常发生大量驱动基因变异，但目前适用于肺鳞癌的靶向治疗药物很少。因此开发针对肺鳞癌变异驱动基因的新型疗法是急需解决的关键问题。

近年来发展了第三代基因组编辑技术，CRISPR/Cas9系统对基因靶点的高效修改使其成为抑制肿瘤细胞驱动基因功能的有力手段。该系统由两个组分构成：RNA导向的核酸内切酶Cas9和单链导向RNA(sgRNA)。导向RNA结合Cas9，并介导Cas9与其互补基因组序列的结合和剪切。Cas9的剪切产生了双链DNA断裂(DSB)，机体会通过非同源末端连接(NHEJ)或同源重组(HDR)方式修复，从而导致靶序列的破坏或修改。其中通过NHEJ方式敲除癌基因，可以简便地使其失活，达到抑制癌基因功能的目标。

虽然目前已有众多针对罕见病的基因编辑疗法处于临床前或临床试验阶段，例如地中海贫血和脊髓性肌萎缩症等，但针对恶性肿瘤的成功基因编辑疗法仍然很少。最重要的原因是缺乏有效的递送手段。肿瘤细胞的表面蛋白谱与同组织的正常细胞相比已发生显著变化，目前常用的基因治疗载体对肿瘤细胞的感染效率明显下降。另外包括肺鳞癌在内的多种恶性肿瘤灶都位于体内脏器，目前基因治疗载体的局部注射方式无法对全部肿瘤灶形成有效感染和治疗。因此改造基因治疗载体，提高其对目标肿瘤细胞的感染效率和特异性，使其能够以静脉或腹腔注射等系统性方式给药，是成功开发肺鳞癌和其他恶性肿瘤基因编辑疗法的重要前提。

目前肿瘤基因治疗临床试验最常用的载体为5型腺病毒载体(ADV5)，约占临床试验总数的22％。例如通过ADV5载体表达抑癌基因P53，用于治疗头颈部肿瘤。但它的受体免疫球蛋白样细胞黏附分子(CXADR)广泛表达于各种细胞表面，使其对肿瘤细胞缺乏感染特异性。而且ADV5载体的免疫原性较强，大部分人体内都已存在IgM抗体，会介导病毒中和效应，降低基因治疗的疗效。

因此，目前适于基因编辑治疗肺鳞癌的载体仍有待研究。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决现有技术中存在的技术问题至少之一。

在本发明的一个方面，本发明提出了一种重组蛋白。根据本发明的实施例，所述重组蛋白包括：上皮细胞黏附分子抗体片段；腺病毒受体免疫球蛋白样细胞黏附分子的胞外区片段；以及T4噬菌体Fibritin片段，所述T4噬菌体Fibritin片段的两端分别连接上皮细胞黏附分子抗体片段和腺病毒受体免疫球蛋白样细胞黏附分子的胞外区片段。