[发明专利]一种D-异抗坏血酸钾的高效液相检测方法

说明书

本发明提供了一种D‑异抗坏血酸钾的高效液相检测方法，检测色谱条件为：利用高效液相色谱进行分析，采用聚丙烯酰胺键合硅胶色谱柱；磷酸盐缓冲溶液与乙腈的混合溶液为流动相；乙腈与水的混合溶液为稀释剂，以紫外检测器检测。本发明样品预处理步骤简单，D‑异抗坏血酸钾不需要衍生，检测时间短，而且本发明提供的方法具有较高的灵敏度；本发明提供的方法能够较好地实现对D‑异抗坏血酸钾含量的测定，而且有利于满足生产过程中对质量控制的需要。

技术领域

本发明涉及色谱检测领域，具体涉及一种D-异抗坏血酸钾的高效液相检测方法。

背景技术

D-异抗坏血酸钾，学名：D-2，3，5，6-四羟基-2-乙烯酸-γ-内酯钾盐，又名异抗坏血酸钾，赤藻糖酸钾。分子式为：C₆H₇KO₆。该产品为白色粉末或颗粒，无臭，稍有咸味，易溶于水。D-异抗坏血酸钾是一种新型抗氧化剂，可有效的保持食品的色泽，自然风味，延长保质期，同时也能抑制食品中致癌物质亚硝胺的形成。该产品也可应用于毛纺、电镀、卷烟、饲料加工、工业水处理和石油化工等行业。在现有公开的技术中无D-异抗坏血酸钾相关的检测方法，在类似物D-异抗坏血酸钠检测方法GB1886.28中有规定有碘滴定法；张志刚发明一种D-异抗坏血酸钠的含量检测方法，使用十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以磷酸二氢钾溶液－甲醇为流动相，以紫外检测器检测；目前D-异抗坏血酸钾作为一种新化学物质，没有任何现代分析仪器测定的相关文献，碘滴定法在检测过程中无法精确的检测出D-异抗坏血酸钾的含量，滴定法测试含量易受其他与碘发生反应的物质干扰，因此，需要一个快速且精确的D-异抗坏血酸钾定量检测方法，以满足质检控制过程中的需要。

发明内容

本发明提出了一种D-异抗坏血酸钾的高效液相检测方法，能够快速且精确的D-异抗坏血酸钾定量检测方法，以满足质检控制过程中的需要。

实现本发明的技术方案是：

一种D-异抗坏血酸钾的高效液相检测方法，检测色谱条件为：利用高效液相色谱进行分析，采用聚丙烯酰胺键合硅胶色谱柱；磷酸盐缓冲溶液与乙腈的混合溶液为流动相；乙腈与水的混合溶液为稀释剂，以紫外检测器检测。

所述流动相中磷酸盐缓冲溶液与乙腈的体积比为（25-29）：（71-75），其中磷酸盐缓冲溶液的浓度为18-22 mmol/L，pH值为6.5-6.7。

所述稀释剂中乙腈与水的体积比为（25-29）：（71-75）；流速：0.8-1.0mL/min；柱温：30-40℃；紫外检测器检测波长：240nm。

所述的D-异抗坏血酸钾的高效液相检测方法，具体步骤为：

（1）色谱条件：以紫外检测器检测；聚丙烯酰胺键合硅胶色谱柱；磷酸盐缓冲溶液与乙腈的混合溶液为流动相；乙腈与水的混合溶液为稀释剂；

（2）待测样品溶液的制备：取待测样品0.008-0.015g，置于100mL容量瓶中，加稀释剂充分溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为待测样品溶液；

（3）对照品溶液：取标准品0.008-0.015g，置于100mL容量瓶中，加稀释剂充分溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；D-异抗坏血酸钾来源于新郑州拓洋生物工程有限公司自制，经过提取精制，纯度99.5%。

（4）含量测定方法：分别吸取待测样品溶液和对照品溶液各10μL-20μL注入高效液相色谱仪，记录色谱图；按外标法分别以峰面积计算样品中D-异抗坏血酸钾的含量。

所述步骤（1）中待测样品溶液和步骤（2）中对照品溶液的浓度均为80-150 mg/L。

所述紫外检测器的检测波长为210-240nm。