[发明专利]cMLCK基因导入

说明书

本发明涉及用于cMLCK基因导入的组分和方法。在某一方面，本发明提供了通过cMLCK基因导入治疗重度心衰的组分和方法，特别的，通过对个体施用有效剂量的编码cMLCK蛋白的多核苷酸载体，该多核苷酸载体在个体的心脏细胞内编码cMLCK蛋白，从而提高心脏的心室功能。在另一方面，本发明提供了在个体体内表达cMLCK蛋白的组分和方法。特别的，通过为个体施用一种能够编码cMLCK蛋白的多核苷酸载体，且该载体能够在个体心脏细胞内表达cMLCK蛋白，其中个体患重度心衰。

1.技术领域

本发明涉及用于cMLCK基因导入的组分和方法。在某一方面，本发明提供了通过cMLCK基因导入治疗重度心衰的组分和方法，特别的，通过对个体施用有效剂量的编码cMLCK蛋白的多核苷酸载体，该多核苷酸载体在个体的心脏细胞内编码cMLCK蛋白，从而提高心脏的心室功能。在另一方面，本发明提供了在个体体内表达cMLCK蛋白的组分和方法。特别的，通过为重度心衰个体施用一种能够编码cMLCK蛋白的多核苷酸载体，且该载体能够在个体心脏细胞内表达cMLCK蛋白。

2.背景技术

心衰影响了约500万的美国人口，并以每年55万人的速度在增长。目前对心力衰竭的治疗主要是血管紧张素转换酶(ACE)抑制剂，其主要作用是扩张血管，降低血压以减轻心脏负荷。虽然ACE抑制剂对死亡率下降的影响具有统计学差异，但实际的下降比例仅为3％-4％，同时还可能伴有副作用。其它的心衰治疗方法同样也具有限制性，比如心脏移植手术由于价格昂贵、创伤性大以及缺乏供体等原因而受到限制。医疗器械装置的使用，比如双心室起搏器同样受到了创伤性和价格的限制。基于以上原因，有必要开发一种新的治疗心衰的方法。

对患有心衰或者可能发生心衰的病人给予neuregulin(以下简称NRG)的摄入可能是一种有前途的治疗方法。NRGs是EGF样生长因子家族，由结构上相似的生长及分化因子NRG1，NRG2，NRG3，NRG4以及它们的亚型组成，并涉及一系列的生物反应：刺激乳腺癌细胞分化和乳汁蛋白分泌，诱导神经嵴细胞分化成Schwann细胞；刺激骨骼肌细胞合成乙酰胆碱受体；并且促进心肌细胞成活和DNA合成。用纽兰格林基因严重缺陷的纯合子小鼠胚胎做活体研究证明纽兰格林对于心脏和神经发育是必须的。

NRGs与EFG受体家族的成员结合，该受体家族包括EGFR、ErbB2、ErbB3和ErbB4，其中每一个受体在多种细胞功能中都发挥重要的作用，包括细胞生长、分化和存活。它们都是蛋白酪氨酸激酶受体，由一个胞外配体结合域、跨膜激酶域和胞浆的酪氨酸激酶结构域组成。NRG结合至ErbB3或ErbB4的细胞外结构域后，能够诱导构象改变从而引起ErbB3、ErbB4和ErbB2之间形成异二聚体，或者ErbB4自身形成同源二聚体，这样就会导致受体细胞内C-末端结构域的磷酸化。然后磷酸化的胞内结构域与细胞内其他的信号蛋白结合，活化相应的下游AKT或ERK信号传导途径，并诱导一系列的细胞反应，比如刺激或抑制细胞增殖、细胞分化、细胞凋亡、细胞迁移或细胞粘附。在这些受体中，ErbB2和ErbB4主要在心脏表达。

已有研究表明NRG-1的EGF类似区，约50至64个氨基酸，足以结合并活化这些受体。以前的研究表明纽兰格林-1β(NRG-1β)能以高亲和力直接结合ErbB3和ErbB4。孤儿受体ErbB2能与ErbB3或ErbB4形成异源二聚体并且其亲和力比ErbB3或ErbB4同源二聚体要高。神经发育的研究结果提示交感神经系统的形成需要完整的NRG-1β、ErbB2和ErbB3信号传导系统。靶向破坏NRG-1β、或ErbB2或ErbB4后由于心脏发育缺陷而导致胚胎致死。最近的研究也突显了NRG-1β、ErbB2和ErbB4在心血管发育以及维持成年正常心脏功能方面具有重要作用。研究表明NRG-1β能增强成年心肌细胞的肌小节的组织结构。通过静脉滴注持续释放NRG能显著改善或防御不同心衰动物模型的心肌功能恶化。这些结果使得NRG-1有望成为一种治疗心衰的先导化合物。