[发明专利]靶向Galectin-3基因的miRNA-128-3p及其抗胰腺癌的用途

说明书

本发明公开一种靶向Galectin‑3基因的miRNA‑128‑3p，所述miRNA‑128‑3p的序列：UCACAGUGAACCGGUCUCUUU。本发明还公开一种靶向Galectin‑3基因的miRNA‑128‑3p的药物载体，所述药物载体为HUCMSCs来源的外泌体。本发明另外还公开实验性验证靶向Galectin‑3基因的HUCMSCs外泌体携载miRNA‑128‑3p在抗胰腺癌中的用途，本发明的实施例中成功将miRNA‑128‑3p mimic转染至新生儿脐带组织来源HUCMSCs‑EXO，构建成工程化EXO；工程化EXO可靶向Galectin‑3抑制胰腺癌细胞的迁移、侵袭及增殖。

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种靶向Galectin-3基因的HUCMSCs外泌体携载miRNA-128-3p及其抗胰腺癌的用途。

背景技术

胰腺癌(Pancreatic cancer)是临床上常见的消化系统恶性肿瘤。患者确诊后1年内死亡率约75％，5年生存率低于6％。在欧美国家，胰腺癌已是第4位常见的恶性肿瘤。在我国，胰腺癌的年发病率约511/10万，预计每年新增5万～6万例。多数胰腺癌患者早期无明显不适，发现时已处于晚期，错失了根治性手术切除的机会，只能以放化疗为主。但是化疗药物不能够特异性杀伤癌细胞，一些正常的细胞也可被杀伤，如骨髓、肠黏膜及毛囊。此外，一些癌细胞可以在化疗中存活下来并对化疗药物耐药，甚至有的化疗药物会刺激正常细胞突变成癌细胞，癌症干细胞不易受化疗药物的影响，经过一段时间的治疗后，癌症干细胞又会很快地引起癌症复发。因此寻找靶向性强、特异性好、副作用小的新型胰腺癌治疗方法显得尤为重要。

外泌体(Exosome,EXO)是直径为50～200nm的小囊泡，可由多种细胞分泌，具有脂质双分子膜结构，包裹少量胞质，胞质中含有母细胞中除了细胞器以外的各种分子成分，包括蛋白及核酸。EXO来源广泛，容易获取及保存，具有良好的生物相容性，因此，可以进行改造作为转运各种生物分子(如药物、蛋白和小分子RNA)的重要载体，与癌细胞相互作用，影响肿瘤发生、发展、侵袭及迁移等行为学表现。

间充质干细胞(mesenchymal stem cell，MSC)是源自早期中胚层和外胚层的多能干细胞，能够分化为成骨、成脂及成软骨细胞，具有显著的自我更新和多向分化能力。而脐带是连接母亲与新生儿之间的组织，其中有两条动脉及一条静脉，脐带羊膜和血管之间，由华通氏胶填充。从人脐带中可以分离得到脐带间充质干细胞(HUCMSCs)，它具有良好的增殖和分化能力，与人骨髓间充质干细胞(human bone mesenchymal stem cell,HBMSC)相比，脐带间充质干细胞具有来源丰富、收集相对简便、增殖更新速度快等优势，是临床应用潜力较高的干细胞来源。

在肿瘤微环境中，炎性介质、低氧环境和其他肿瘤衍生因子诱导间充质干细胞的归巢能力，在肿瘤部位自发聚集，并通过与先天和后天免疫系统的相互作用逃避免疫反应。细胞外囊泡系统反映了亲代细胞的特征。来源于间充质干细胞的EXO具有自发定位肿瘤部位的能力。研究人员已经成功地将来源于间充质干细胞的EXO作为货物的载体。O'Brien等人发现miR-379在肿瘤细胞和组织中的表达降低，如乳腺癌、肝细胞癌和骨肉瘤。此外，据报道miR-379能够抑制肿瘤的增殖、迁移和侵袭。在乳腺癌的治疗中，通过慢病毒将miR-379转染间充质干细胞。与阴性对照组相比，获得的间充质干细胞EXO显示出高5倍的miR-379表达。将这些EXO通过静脉注射到患有乳腺癌的小鼠体内，经过一系列的对照研究后，间充质干细胞衍生的载有miR-379的EXO在治疗乳腺癌荷瘤小鼠后，肿瘤的生长明显受到抑制；该报道论证了HUCMSCs来源的EXO具有作为治疗载体的可行性。