[发明专利]双功能抗原引导的西地那非和他达拉非的抗体阵列检测卡

说明书

本发明涉及一种双功能抗原引导的西地那非和他达拉非的抗体阵列检测卡，包括衬板、以及依次粘附于衬板上且相邻之间部分叠置的双功能抗原释放垫、通用荧光探针释放垫、层析膜和吸水垫；所述双功能抗原释放垫包含由卵清白蛋白分别和西地那非、他达拉非偶联而成的检测抗原的基础上偶联特定标记物；所述通用荧光探针释放垫包含标记有抗特定标记物抗体的通用荧光探针；所述层析膜设有检测线A、检测线B和质控线，分别固定抗西地那非、抗他达拉非抗体和抗特定标记物抗体。本发明可以用一种通用荧光探针解决所有检测试剂的生产，降低了成本和提高质量控制可靠性；又增加了检测的信号强度和稳定性，提高了检测灵敏度和定量精密度。

技术领域

本发明涉及食品药品安全检测领域，尤其涉及双功能抗原引导的西地那非和他达拉非的抗体阵列检测卡。

背景技术

西地那非和他达拉非的俗名分别为“伟哥”和“超级伟哥”，都属于磷酸二酯酶-5(PDE-5)抑制剂药物，是风行全球的治疗阳痿和壮阳药物。由于这两种效果明显且仿制价格低廉，不法厂家在壮阳保健食品(以保健酒为主)中违法添加西地那非和他达拉非，以增强疗效牟取不正当利益。这两种PDE-5抑制剂药物属于处方药，会引起一系列副作用，如头痛、面部潮红、消化不良、视力模糊和肌肉酸痛。美国FDA官方网页发布的药物不良反应信息显示，服用PDE-5抑制剂药物可能导致失明，还会导致听力突然下降甚至失聪。因此，世界各国对PDE-5抑制剂药物都严格按照处方药管理，在没有医生指导下服用违法添加的该类药品是危险的。其次，PDE-5抑制剂药物与硝酸酯药物的相互作用会导致严重的低血压。硝酸酯药物广泛应用于糖尿病、高血压,高血脂和冠心病的治疗，患有这些疾病而又伴随阳痿症状的病人，往往求助于天然壮阳药品。如果这些病人服用了硝酸酯药物的同时，在不知情的情况下，有服用了含违法的PDE-5抑制剂药物的中成药(保健品)，将会导致可怕的后果。患者不知情而长期服用含西地那非和他达拉非的保健食品，其危害性是非常严重的，必须加强对违法添加西地那非和他达拉非产品的监督检查。

目前，检测违法添加西地那非和他达拉非的确证方法是高效液相色谱、液-质联用检测。但是这些方法设备投入大、运行费用高，样品预处理复杂，不能够现场进行检测，难以大规模对违法添加现象展开筛查。现有西地那非和他达拉非的快速检测方法主要是化学检测方法和薄层色谱检测方法，检测的灵敏度和抗干扰能力有提高的需要。

另外，由于免疫学检测方法灵敏、特异、快速和廉价，在食品安全检测领域也被广泛应用。目前报道的针对小分子化合物的荧光免疫检测方法，都是将量子点微球标记于检测抗体上制备荧光探针，与检测线上固定的检测抗原形成免疫复合物，产生检测信号。但该方法存在以下缺点：1、检测不同的目标物质，需分别采用相应的检测抗体连接量子点微球制备荧光探针，工作量大、良品率低、质量不稳定；2、检测抗体通过化学反应制备荧光探针，可能影响抗体的结构和免疫亲和力；3、缺乏信号放大机制，检测信号强度偏弱、灵敏度较低。

已有的专利技术利用“三文治免疫复合物”原理进行检测食品添加物，即利用针对“检测抗原载体蛋白”的抗体，作为“通用抗体”的结合位点介导“通用探针”识别“检测抗原”，形成三文治免疫复合物产生检测信号，从而实现检测目的。但是“检测抗原载体蛋白”的免疫原性不稳定，蛋白质构象发生轻微的变化，都会导致“通用抗体”与“检测抗原”亲和力的下降，弱化“三文治免疫复合物”的形成，影响检测信号的产生。

发明内容

基于上述检测方法的缺点，本发明的目的是提供一种双功能抗原引导的西地那非和他达拉非的抗体阵列检测卡。

本发明采用的技术方案如下：