[发明专利]标记物抗体探针检测双氯芬酸和吲哚美辛的侧向抗体芯片

说明书

本发明涉及一种标记物抗体探针检测双氯芬酸和吲哚美辛的侧向抗体芯片，包括衬板、以及依次粘附于衬板上且相邻之间部分叠置的双功能抗原释放垫、通用荧光探针释放垫、层析膜和吸水垫；所述双功能抗原释放垫包含由卵清白蛋白分别和双氯芬酸、吲哚美辛偶联而成的检测抗原的基础上偶联特定标记物；所述通用荧光探针释放垫包含标记有抗特定标记物抗体的通用荧光探针；所述层析膜设有检测线A、检测线B和质控线，分别固定抗双氯芬酸抗体、抗吲哚美辛抗体和抗特定标记物抗体。本发明可以用一种通用荧光探针解决所有检测试剂的生产，降低了成本和提高质量控制可靠性；又增加了检测的信号强度和稳定性，提高了检测灵敏度和定量精密度。

技术领域

本发明涉及食品药品安全检测领域，尤其涉及标记物抗体探针检测双氯芬酸和吲哚美辛的侧向抗体芯片。

背景技术

双氯芬酸和吲哚美辛都属于非甾体抗炎药，具有抗炎、镇痛及解热作用。由于这两种止痛效果迅速且价格低廉，不法厂家在针对风湿性疾病的保健食品(以保健酒为主)中违法添加双氯芬酸和吲哚美辛，以增强疗效牟取不正当利益。这两种非甾体抗炎药物属于处方药，不当服用可能对消化道、肝脏和肾脏造成损伤，严重的甚至导致过敏性休克和急性肾功能衰竭。患者不知情而长期服用含双氯芬酸和吲哚美辛的保健食品，其危害性是非常严重的，必须加强对违法添加双氯芬酸和吲哚美辛产品的监督检查。

目前，检测违法添加双氯芬酸和吲哚美辛的确证方法是高效液相色谱、液质联用检测。但是这些方法设备投入大、运行费用高，样品预处理复杂，不能够现场进行检测，难以大规模对违法添加现象展开筛查。现有双氯芬酸和吲哚美辛的快速检测方法主要是化学检测方法和薄层色谱检测方法，检测的灵敏度和抗干扰能力有提高的需要。

另外，由于免疫学检测方法灵敏、特异、快速和廉价，在食品安全检测领域也被广泛应用。目前报道的针对小分子化合物的荧光免疫检测方法，都是将量子点微球标记于检测抗体上制备荧光探针，与检测线上固定的检测抗原形成免疫复合物，产生检测信号。但该方法存在以下缺点：1、检测不同的目标物质，需分别采用相应的检测抗体连接量子点微球制备荧光探针，工作量大、良品率低、质量不稳定；2、检测抗体通过化学反应制备荧光探针，可能影响抗体的结构和免疫亲和力；3、缺乏信号放大机制，检测信号强度偏弱、灵敏度较低。

已有的专利技术利用“三文治免疫复合物”原理进行检测食品添加物，即利用针对“检测抗原载体蛋白”的抗体，作为“通用抗体”的结合位点介导“通用探针”识别“检测抗原”，形成三文治免疫复合物产生检测信号，从而实现检测目的。但是“检测抗原载体蛋白”的免疫原性不稳定，蛋白质构象发生轻微的变化，都会导致“通用抗体”与“检测抗原”亲和力的下降，弱化“三文治免疫复合物”的形成，影响检测信号的产生。

发明内容

基于上述检测方法的缺点，本发明的目的是提供一种标记物抗体探针检测双氯芬酸和吲哚美辛的侧向抗体芯片。

本发明采用的技术方案如下：

一种标记物抗体探针检测双氯芬酸和吲哚美辛的侧向抗体芯片，包括衬板、以及依次粘附于衬板上且相邻之间部分叠置的双功能抗原释放垫、通用荧光探针释放垫、层析膜和吸水垫；所述双功能抗原释放垫包含由卵清白蛋白分别和双氯芬酸、吲哚美辛偶联而成的检测抗原的基础上偶联特定标记物；所述通用荧光探针释放垫包含标记有抗特定标记物抗体的通用荧光探针；所述层析膜设有检测线A、检测线B和质控线，所述检测线A、检测线B分别固定抗双氯芬酸和抗吲哚美辛抗体，所述质控线固定抗特定标记物抗体。

优选地，所述特定标记物为7-氨基-4-羟基-2-萘磺酸。