[发明专利]一种表达LL-37多肽的重组表达载体、重组乳酸乳球菌、抗病毒药物及构建方法和应用有效
申请号: | 202010313254.4 | 申请日: | 2020-04-20 |
公开(公告)号: | CN111500615B | 公开(公告)日: | 2021-05-14 |
发明(设计)人: | 金万洙;张瀚林;蒋笑笑;郑爱华 | 申请(专利权)人: | 中国科学院动物研究所 |
主分类号: | C12N15/74 | 分类号: | C12N15/74;C12N15/62;C12N1/21;A61K35/744;A61P31/04;A61P31/12;A61P31/14;C12R1/01 |
代理公司: | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人: | 瞿晓晶 |
地址: | 100101 北京市朝阳区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 表达 ll 37 多肽 重组 载体 乳酸 球菌 抗病毒 药物 构建 方法 应用 | ||
本发明提供了一种表达LL‑37多肽的重组表达载体、重组乳酸乳球菌、抗病毒药物及构建方法和应用,属于基因工程技术领域;所述重组表达载体的构建用骨架质粒为PNZ8149;所述重组表达载体中插入有融合基因;所述融合基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明的重组表达载体能够在乳酸乳球菌中高效表达,表达得到的LL‑37能够有效抑制SARS冠状病毒和SARS‑CoV2冠状病毒。本发明还提供了一种包含上述方案所述重组表达载体的重组乳酸乳球菌。通过本发明的重组乳酸乳球菌能够将抗病毒多肽药物LL‑37以口服的形式输入人体,抗病毒效果好、生产成本低。
技术领域
本发明涉及基因工程技术领域,尤其涉及一种表达LL-37多肽的重组表达载体、重组乳酸乳球菌、抗病毒药物及构建方法和应用。
背景技术
LL-37是一种抗菌肽,也具有抗病毒活性。传统的LL-37制备方法为人工合成的方法,但是人工合成的方法成本高昂,大大限制了LL-37的应用。现有技术公开了利用基因工程手段,通过构建包含LL-37编码基因的重组表达载体、重组菌来制备获得LL-37,但是目前的方法仍然存在LL-37表达效率低、生产成本高的技术问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种表达LL-37多肽的重组表达载体、重组乳酸乳球菌、抗病毒药物及构建方法和应用,本发明的重组表达载体能够在乳酸乳球菌中高效表达,从而实现LL-37多肽口服递送,能够降低生产成本。
为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:
本发明提供了一种表达LL-37多肽的重组表达载体,所述重组表达载体的构建用骨架质粒为PNZ8149;所述重组表达载体中插入有融合基因;所述融合基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
优选的,所述融合基因插入在PNZ8149的SphI和XbaI限制性酶切位点之间。
本发明提供了一种包含上述方案所述重组表达载体的重组乳酸乳球菌。
优选的,所述重组乳酸乳球菌的原始菌株包括乳酸乳球菌NZ3900。
本发明提供了上述方案所述重组乳酸乳球菌的构建方法,包括以下步骤:利用上述方案所述重组表达载体转化乳酸乳球菌感受态细胞,得到重组乳酸乳球菌。
本发明提供了上述方案所述重组表达载体或者所述重组乳酸乳球菌在制备抗细菌和/或抗病毒的药物中的应用。
优选的,所述病毒包括冠状病毒。
优选的,所述冠状病毒包括SARS冠状病毒和/或SARS-CoV2冠状病毒。
本发明还提供了一种抗细菌和/或抗病毒的药物,所述药物包括上述方案所述重组乳酸乳球菌。
优选的,所述药物的剂型包括片剂、颗粒剂、丸剂、胶囊剂或口服液。
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