[发明专利]一种降低芍药组织培养中外植体污染的方法在审
| 申请号： | 202010314221.1 | 申请日： | 2020-04-20 |
| 公开（公告）号： | CN111602594A | 公开（公告）日： | 2020-09-01 |
| 发明（设计）人： | 张利;敖青霞;姜媛媛;赵茂俊;倪苏;王龙;胡佳;冯均;周劲;余燕;王海平;吴金勇;陈欢 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 成都东恒知盛知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 51304 | 代理人： | 何健雄;廖祥文 |
| 地址： | 610000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 降低 芍药 组织培养 中外 污染 方法 | ||
1.一种降低芍药组织培养中外植体污染的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)采集芍药幼嫩部位进行低温处理；
(2)低温处理后的芍药外植体使用洗洁精浸泡后流水冲洗；
(3)冲洗完毕后的芍药外植体，浸泡在多菌灵和青霉素钠混合溶液中并置于摇床；
(4)浸泡后的芍药外植体由75％酒精消毒，再以0.1％升汞消毒进行表面消毒；
(5)消毒后的芍药外植体在含有益培灵的培养基中培养。
2.根据权利要求1所诉的一种降低芍药组织培养中外植体污染的方法，其特征在于，所述步骤1低温处理为将新采集的芍药外植体用锡箔纸包裹置于4℃冰箱中，低温处理24-48h。
3.根据权利要求1所诉的一种降低芍药组织培养中外植体污染的方法，其特征在于，所述步骤2芍药外植体由稀释洗洁精浸泡20min，清洗外表的泥沙后流水冲洗芍药外植体1h。
4.根据权利要求1所诉的一种降低芍药组织培养中外植体污染的方法，其特征在于，所述步骤3将芍药外植体浸泡在浓度为3-5g/L的多菌灵和浓度为0.5-1.5g/L青霉素钠混合溶液的培养瓶中，置于摇床，振荡速度为160 1/min，振荡时间为1h，然后用无菌蒸馏水清洗三次，将培养瓶表面喷洒75％酒精后放入超净工作台中大风吹20min。
5.根据权利要求1所诉的一种降低芍药组织培养中外植体污染的方法，其特征在于，所述步骤4在超净工作台上，用75％酒精消毒10s，无菌蒸馏水清洗3次，0.1％升汞消毒7-8min，无菌蒸馏水清洗8-10次。
6.根据权利要求1所诉的一种降低芍药组织培养中外植体污染的方法，其特征在于，所述步骤5将芍药外植体切为适宜大小，接入到含有益培灵的培养基中，22-25℃下黑暗培养一周。
7.根据权利要求6所诉的一种降低芍药组织培养中外植体污染的方法，其特征在于，所述培养基为：MS+蔗糖30g/L+TDZ 2.5mg/L+琼脂粉7.5g/L+益培灵0.1-0.2g/L，培养基pH值调至5.8-6.0，将配制好的培养基装入培养瓶中，121℃高温灭菌25min。
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