[发明专利]一种水样中氨氮及其同位素含量的气-质谱色谱联用检测方法

权利要求书

1.一种水样中氨氮及其同位素含量的气-质谱色谱联用检测方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)取体积为V_b的待测水样，调节pH2 .0后过滤，然后浓缩至体积为V_a；

(2)调节步骤(1)中浓缩后的待测水样的pH值为5.5～6.5，加入中性甲醛进行反应，反应结束后将所得反应液的pH调节至8.5-9.5，然后浓缩至近0.5mL，再用甲醇定容至体积为1ml，存放于-20℃冰箱中，待测；

(3)取体积为V_b的二次蒸馏水，然后浓缩至体积为V_a，再用浓缩后的二次蒸馏水代替步骤(2)中浓缩后的待测水样并进行步骤(2)的操作，得到用甲醇定容至体积为1ml的空白溶液，存放于-20℃冰箱中，待测；

(4)配置不少于5份¹⁴NH₄⁺浓度在0～200μmol/L范围内的(¹⁴NH₄)₂SO₄水溶液以及不少于5份¹⁵NH₄⁺浓度在0～200μmol/L范围内的(¹⁵NH4) ₂SO₄水溶液作为标准工作液，或者配制不少于5份¹⁴NH₄⁺浓度和¹⁵NH₄⁺浓度均在0～200μmol/L范围内的(¹⁴NH₄) ₂SO₄和(¹⁵NH₄) ₂SO₄混合水溶液作为标准工作液，然后对标准工作液重复步骤(2)的操作，得到用甲醇定容至1.0ml的标准液，存放于-20℃冰箱中，待测；

(5)设置好GC-MS仪器测量参数，按照仪器序列进样步骤(4)所得的待测溶液，进样体积为1μl，以m/z为140和144定性，以¹⁴NH₄⁺对应的色谱峰面积或峰高作为纵坐标，以标准工作液中¹⁴NH₄⁺浓度为横坐标绘制¹⁴N的标准曲线进行定量；以¹⁵NH₄⁺对应的色谱峰面积或峰高作为纵坐标，以标准工作液中¹⁵NH₄⁺浓度为横坐标绘制¹⁵N的标准曲线进行定量；

(6)按照步骤(5)对步骤(2)中的待测样品溶液和步骤(3)中的待测空白溶液进行检测工作，根据步骤(5)标准曲线以及色谱峰面积或峰高得出待测样品溶液含量ρ₀以及待测空白溶液含量ρ空白；

(7)样品中氨氮¹⁴N或¹⁵N含量用ρ_s表示，结果按照如下公式计算

其中，ρ_s：待测水样中¹⁴NH₄⁺或¹⁵NH₄⁺浓度，μmol/L；ρ₀：标准曲线上读到待测样品溶液中¹⁴NH₄⁺或¹⁵NH₄⁺的浓度，μmol/L；V_a：浓缩后的待测水样的体积，ml；V_b：待测水样的取样体积，ml；ρ空白：空白对照在校准曲线上读到的¹⁴NH₄⁺或¹⁵NH₄⁺值，μmol/L；

步骤(2)中所述的中性甲醛是指不含游离酸的甲醛；

步骤(2)中所述的浓缩至近0.5ml指利用液液萃取或固相萃取方法进行初浓缩，再将所得浓缩液在不高于40℃的条件下用氮气吹干至近0.5ml；

步骤(2)中所述的液液萃取中所用的溶剂为三氯甲烷；

步骤(2)中所述的固相萃取中，固相萃取小柱填料为C₁₈，萃取前依次用10ml甲醇和10ml二次蒸馏水进行活化，活化过程中小柱不能留空变干；固相萃取过程中，待萃取的溶液过C₁₈固相萃取小柱的流速为5ml/min；润洗盛装分析样品的容器的水体积为3.0ml；淋洗液为二次蒸馏水和HPLC级甲醇，体积各为3.0ml；洗脱液为体积比为5:95的氨水-甲醇混合液，体积为15ml；

步骤(5)中所述的GC-MS仪器测量参数为：进样口温度：280℃；进样模式：分流进样，分流比为10:1；升温程序：50℃保持2min，以10℃/min的速率升温至125℃，保持1min，再以40℃/min的速率升温至280℃，保持1min；载气：He，流速为1.0ml/min；质谱端传输线温度：280℃；离子源温度：280℃；扫描方式为全扫描或选择离子扫描，扫描范围为50-300amu，选择离子扫描模式扫描所用特征离子的分别为140和144。