[发明专利]一种海藻酸钠-壳聚糖微球、其包被的干细胞及其制剂、制法和应用

权利要求书

1.一种海藻酸钠-壳聚糖微球，其特征在于，所述海藻酸钠-壳聚糖微球的直径为5-50μm，所述海藻酸钠-壳聚糖微球的制备方法包括以下步骤：

(1)将海藻酸钠加入到生理盐水中，充分搅拌，形成质量浓度为1-3％的海藻酸钠溶液；

(2)将壳聚糖加入到浓度为5-60％的乙酸溶液中，充分溶解，形成质量浓度为1-3％的壳聚糖溶液；

(3)将壳聚糖溶液加入到海藻酸钠溶液中，搅拌溶解，所述壳聚糖溶液与海藻酸钠溶液的体积比1:5-4:1，形成壳聚糖/海藻酸钠分散液；

(4)使用喷雾干燥技术将壳聚糖/海藻酸钠分散液制成微球，即得微球；

(5)将微球浸泡于浓度为0.1％的海藻酸钠溶液中交联2-12h，所述微球在所述海藻酸钠溶液中的浓度为0.1-0.3g/ml，将交联后的微球洗涤、干燥，即得海藻酸钠-壳聚糖微球。

2.如权利要求1所述的海藻酸钠-壳聚糖微球，其特征在于，步骤(1)所述的海藻酸钠溶液中海藻酸钠的质量浓度为2％。

3.如权利要求1所述的海藻酸钠-壳聚糖微球，其特征在于，步骤(2)所述的壳聚糖溶液中壳聚糖的质量浓度为2％。

4.如权利要求1所述的海藻酸钠-壳聚糖微球，其特征在于，步骤(3)所述的搅拌溶解时的搅拌速度为50-300rpm。

5.如权利要求1所述的海藻酸钠-壳聚糖微球，其特征在于，步骤(4)所述的喷雾干燥的条件如下：进风温度为120-180℃，出风温度为50-80℃，进料速度为5-10mL/min。

6.权利要求1所述的海藻酸钠-壳聚糖微球在制备包裹间充质干细胞的保护剂中的应用。

7.权利要求1所述的海藻酸钠-壳聚糖微球在制备干细胞制剂的微球载体中的应用。

8.权利要求1所述的海藻酸钠-壳聚糖微球在制备维持干细胞活性及多能性的产品中的应用。

9.一种由权利要求1所述的海藻酸钠-壳聚糖微球包被的干细胞，其特征在于，所述干细胞的制备方法包括以下步骤：

称量海藻酸钠-壳聚糖微球0.2-0.5g放入10-30ml添加10％胎牛血清的DMEM培养基中，海藻酸钠-壳聚糖微球在培养基中的浓度为7-50g/L，将干细胞以密度1×10⁶/mL-3×10⁶/mL接种至上述微球上，置于37℃，5％CO2孵箱中培养，隔天换液一次，第5天消化细胞后离心，添加10％胎牛血清的DMEM培养基，放置于孵箱中，在37℃，5％CO2条件下培养5-7天。

10.一种由权利要求9所述的干细胞制备的喷雾系统，其特征在于，所述喷雾系统是将喷雾仪器与给药气管管路连接，所述给药气管管路的直径为2mm，长度为20-25cm，PU材质，所述给药气管管路的一端有微孔，另一端连接喷雾仪，喷雾仪里装入含有海藻酸钠-壳聚糖微球包被的干细胞的溶液，即得喷雾系统。