[发明专利]牛细粒棘球蚴病的特异性检测抗原及其应用

说明书

本发明公开了一种牛细粒棘球蚴病的特异性检测抗原及其应用。所述牛细粒棘球蚴病的特异性检测抗原蛋白质，是如下(a1)或(a2)：(a1)氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白质；(a2)将(a1)限定的蛋白质的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，且功能相同的蛋白质。本发明时间分辨荧光微球作为示踪物，制备免疫层析试纸条在临床上操作简单、诊断快速、灵敏度高、特异性强。

技术领域

本发明涉及医疗器械技术领域，具体涉及一种牛细粒棘球蚴病的特异性检测抗原及其应用。

背景技术

细粒棘球蚴病为一种严重的全球性的人畜共患病，人或反刍动物主要通过误食了细粒棘球绦虫排出的虫卵而发病，被称为“虫癌”。目前，关于细粒棘球蚴病诊断技术的研究投入较少，最常用的诊断方法就是解剖查看虫体，随着分子技术和免疫技术的发展，现在有分子诊断，比如LAMP，免疫学诊断，如ELISA试剂盒法、胶体金等，但从临床应用发现，这些方法检测的准确性不高、方便性不强，无法便于基层工作者操作检测。动物感染细粒棘球蚴时，传统的诊断方法为屠宰时诊断，然而，在屠宰过程中，典型的囊状组织也许是炎性导致的肉芽肿，导致诊断错误；血清学诊断包括胶体金免疫层析法、酶联免疫吸附试验。这些方法通常使用的是天然棘球囊液，但使用天然棘球囊液的缺点是易于其他患病动物的血清发生交叉反应，制备昂贵且难以进行商品化。虽然，细粒棘球蚴病在人类诊断方面已有很多研究，但在诊断动物方面的研究甚少，且动物在自然感染该病时，抗体反应不明显，易导致诊断错误。因此提高细粒棘球蚴的免疫诊断，寻找一种可靠的抗原，建立一种高效、准确、特异性好而又简便的诊断技术至关重要。

因此，基于细粒棘球蚴转录组的数据，筛选出Hyppthetical EGR_01530。Hypothetical protein EGR_01530含有一个半胱氨酸的保守结构域，研究报道表明在线虫体内的半胱氨酸蛋白可以调节其自身的蛋白酶活性、宿主的蛋白酶活性和调控宿主的免疫反应。并且据Josiah Ochieng等人报道称相关的半胱氨酸超家族可以确保寄生虫在宿主体内生存。

此外，最近，基于表位的抗原已经成为实现高敏感性和特异性捕获机体所产生的抗体，具有成功替代重组抗原的潜力。利用基于表位抗原的诊断方法已经成功应用于各种疾病，例如、利什曼病、锥体虫病、钩端螺旋体病和弓形虫病。并且，随着生物信息学的发展，为此类抗原的设计提供了新的策略。这些技术使重组蛋白的设计和后期的合成成为可能，且这些重组蛋白具有新的抗原性特征，因此，本发明也选取了基于表位的抗原。作为牛细粒棘球蚴层析试纸条的研制。

发明内容

为此，本发明提供一种牛细粒棘球蚴病的特异性检测抗原及其应用。

本发明所提供的牛细粒棘球蚴病的特异性检测抗原，是如下(a1)或(a2)：

(a1)氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白质；

(a2)将(a1)限定的蛋白质的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，且功能相同的蛋白质。

编码所述抗原蛋白质的核酸分子也是本发明的保护范围。

优选地，所述核酸分子是编码权利要求1所述的蛋白质的基因，所述基因是如下任一所述的DNA分子：

(b1)编码序列如SEQ ID NO.2所示的DNA分子；

(b2)在严格条件下与(b1)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1所述的蛋白质的DNA分子；

(b3)与(b1)或(b2)限定的DNA分子具有90％以上同源性且编码权利要求1所述的蛋白的DNA分子。

本发明还提供所述蛋白质配对用于牛细粒棘球蚴病的抗原蛋白质，是如下(c1)或(c2)：

(c1)氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的蛋白质；