[发明专利]一种生产岩藻甾醇药物中间体和藻多糖的方法在审
申请号: | 202010319692.1 | 申请日: | 2020-04-22 |
公开(公告)号: | CN111410676A | 公开(公告)日: | 2020-07-14 |
发明(设计)人: | 刘加林;霍萧勇;刘加海;方朝杰;张渊源 | 申请(专利权)人: | 杭州巴洛特生物科技有限公司 |
主分类号: | C07J9/00 | 分类号: | C07J9/00;C08B37/00;A01G33/00 |
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地址: | 310018 浙江省杭州市经济技术开发区*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生产 岩藻甾醇 药物 中间体 多糖 方法 | ||
1.一种生产岩藻甾醇药物中间体和藻多糖的方法,其包括如下步骤:
步骤1)培养鼠尾藻,步骤2)制备藻粉,步骤3)制备岩藻甾醇粗品,步骤4)纯化岩藻甾醇,步骤5)分离藻多糖。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤1)培养鼠尾藻,包括:
选择健康的鼠尾藻幼苗,接种到含有鼠尾藻培养液的反应池中,接种密度为60-80株/㎡,反应池中培养液的深度为30-50cm,每4d更换1次鼠尾藻培养液,培养时间为24-40d;培养条件为:光照强度3000lux,温度为22℃,光暗比为12:12,通气量为10-20ml/min·L。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述步骤2)制备藻粉,包括:采收鼠尾藻藻体,通风处自然干燥 5d,然后置于粉碎机粉碎,过50目筛,得到鼠尾藻藻粉。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述步骤3)制备岩藻甾醇粗品,包括:将鼠尾藻藻粉添加到醇提罐中,藻粉和85%乙醇的比例为1g:5ml,升温至50℃,保温条件下,超声波辅助醇提20-40min,停止超声波处理,继续保温醇提9h;然后真空抽滤,收集滤渣和滤液,将滤液置于65℃条件下减压浓缩回收乙醇,直到浓缩至原体积的五分之一,硅胶柱层析,采用体积比为5:1的乙酸乙酯-石油醚混合液进行洗脱,收集岩藻甾醇洗脱液,进行减压浓缩蒸干,即得岩藻甾醇粗品。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述步骤4)纯化岩藻甾醇,包括:按照5ml乙醚:1g岩藻甾醇粗品的比例添加乙醚,搅拌均匀,静置30min,再添加占岩藻甾醇粗品1%质量比的活性炭,55℃搅拌脱色30min,真空抽滤,将滤液减压蒸干,收集固形物,添加95%的乙醇至溶解,调节溶液至饱和状态,置于0℃结晶,收集晶体,干燥即得岩藻甾醇产品。
6.根据权利要求4或5所述的方法,其特征在于,所述步骤5)分离藻多糖,包括:
往步骤3)所得滤渣中添加5倍重量的水,加热至80℃,保温条件下,水提12h,然后以1000rpm离心3min,过滤去除沉淀,将滤液真空浓缩至原体积的四分之一,再添加95%的乙醇,静置60min,然后2000rpm离心5min,收集沉淀,真空干燥至恒重,即得藻多糖。
7.根据权利要求2-6任其一所述的方法,其特征在于,所述鼠尾藻培养液为:f/2培养基+九水偏硅酸钠20-300mg/L+磷酸三铵10-200mg/L。
8.根据权利要求4-6任其一所述的方法,其特征在于,所述超声波的功率为300W,频率为25kHZ。
9.按照权利要求1-8任其一所述的方法得到的岩藻甾醇及其在医药中间体中的应用。
10.按照权利要求1-8任其一所述的方法得到的藻多糖。
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