[发明专利]CHOK1悬浮驯化无血清培养基及悬浮驯化方法在审
| 申请号： | 202010320852.4 | 申请日： | 2020-04-22 |
| 公开（公告）号： | CN111471644A | 公开（公告）日： | 2020-07-31 |
| 发明（设计）人： | 许园元;高云霞;董庸行;宋彦凌 | 申请（专利权）人： | 常州艾米能斯生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 常州市英诺创信专利代理事务所(普通合伙) 32258 | 代理人： | 王美华 |
| 地址： | 213000 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | chok1 悬浮 驯化 血清 培养基 方法 | ||
1.一种CHOK1悬浮驯化无血清培养基，其特征在于：包括如下重量组分：
2.一种CHOK1细胞悬浮驯化方法，其特征在于：包括如下步骤：
步骤1，贴壁转悬浮：使用F-12K+10％FBS培养细胞，细胞汇合度达到70-80％，加胰酶消化，缓慢吹打混匀，按0.5×106cells/ml接种至含10％FBS的F-12K培养基中摇瓶传代，2天后细胞密度达到1×106cells/ml，水平离心5±1min收集细胞；
步骤2，悬浮驯化恢复：将步骤1中摇床摇床传代后收集的细胞以0.5×106cells/ml密度接种到如权利要求1所述的CHOK1悬浮驯化无血清培养基，继续摇床悬浮培养，5天后细胞增殖为1.6×106cells/ml，细胞活率达到88.88％，直接取悬液以0.5×106cells/ml传代，4天后细胞活率为92.6％，接下来取悬液以0.8×106cells/ml密度传代，连续传3代后，完成CHOK1细胞基本驯化；接下来以0.3×106cells/ml传代，每3天传代一次，连续传3代，细胞倍增时间稳定在23～24h，细胞悬浮驯化完成。
3.根据权利要求2所述的CHOK1细胞悬浮驯化方法，其特征在于：步骤1中摇瓶传代培养条件为于37±0.5℃，5±0.5％CO2，125±5rpm摇床中悬浮培养。
4.根据权利要求2所述的CHOK1细胞悬浮驯化方法，其特征在于：步骤1中细胞收集方法为取细胞密度达到1×106cells/ml的细胞悬液，水平离心5±1min后，收集细胞沉淀。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于常州艾米能斯生物科技有限公司，未经常州艾米能斯生物科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202010320852.4/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
