[发明专利]一种产蛋鸡用复合有机微量元素饲料添加剂的制备方法

权利要求书

1.一种产蛋鸡用复合有机微量元素饲料添加剂的制备方法，利用微生物对无机微量元素进行富集，其特征在于：

步骤一、将粪肠球菌进行筛选及驯化培养，粪肠球菌分别在含铁梯度培养基、含铜梯度培养基、含锌梯度培养基、含锰梯度培养基的单元素培养基上驯化，再在铁、铜、锌和锰的四因素四水平混合元素梯度培养基中进行浓度梯度驯化，得耐微量元素粪肠球菌；驯化得到的耐微量元素粪肠球菌在单一元素下最高分别耐受元素浓度为：铁2000mg/L、铜800mg/L、锌2500mg/L、锰2500mg/L，在混合元素下最高耐受元素浓度为铁1200mg/L、铜550mg/L、锌1800mg/L、锰1500mg/L；四因素四水平的混合元素梯度培养基中，铁的梯度浓度包括800mg/L、1000mg/L、1200mg/L和1500mg/L，铜的梯度浓度包括350mg/L、450mg/L、550mg/L和650mg/L，锌的梯度浓度包括1500mg/L、1800mg/L、2100mg/L和2500mg/L，锰的梯度浓度包括1200mg/L、1500mg/L、1800mg/L和2200mg/L；

步骤二、将步骤一得到的耐微量元素粪肠球菌接种于含铁、铜、锌和锰的发酵培养基中，其添加比例为15%~30%，发酵培养基中的元素包括：铁元素浓度600mg/L、铜元素浓度150mg/L、锌元素浓度500mg/L和锰元素浓度350mg/L；

步骤三、实时监测接种后发酵培养基的PH值，调节发酵培养基的PH值为6.8~7.2，发酵采用分段控速发酵，发酵时间为72小时，发酵过程中还向接种后的发酵培养基中流加营养素、矿物盐和PH调节试剂；

步骤四、发酵后离心得湿菌体，湿菌体加稀释剂混合均匀，将混合均匀的湿菌体干燥后得产蛋鸡用复合有机微量元素饲料添加剂。

2.根据权利要求1所述的一种产蛋鸡用复合有机微量元素饲料添加剂的制备方法，其特征在于：步骤二中，每1000份铁、铜、锌和锰的发酵培养基中的成分包括：葡萄糖6份、次粉60份、尿素2.5份、豆粕粉16.5份、磷酸二氢钾0.5份、氯化钠1.5份、硫酸亚铁2.8份、硫酸铜0.6份、硫酸锌2.2份、硫酸锰1.1份、10倍稀释后的板框收集酒精工业黄水浓缩液906.3份。

3.根据权利要求1所述的一种产蛋鸡用复合有机微量元素饲料添加剂的制备方法，其特征在于：步骤三中，营养素包括碳源和氮源，所述碳源包括葡萄糖和次粉，所述氮源包括尿素和豆粕粉；矿物盐包括磷酸二氢钾、氯化钠、硫酸亚铁、硫酸铜和硫酸锌和硫酸锰。

4.根据权利要求3所述的一种产蛋鸡用复合有机微量元素饲料添加剂的制备方法，其特征在于：步骤三中，在发酵过程中，每2h流加碳源、氮源，并通过PH调节试剂调节pH；每6h流加磷酸二氢钾、氯化钠、硫酸亚铁、硫酸铜、硫酸锌和硫酸锰。

5.根据权利要求1或4所述的一种产蛋鸡用复合有机微量元素饲料添加剂的制备方法，其特征在于：发酵培养基的PH值通过氨水进行调节。

6.根据权利要求1所述的一种产蛋鸡用复合有机微量元素饲料添加剂的制备方法，其特征在于：步骤三中，分段控速发酵还包括四个阶段：第一阶段：发酵时间进行至0~12h时，搅拌速度为550~720r/min；第二阶段：发酵时间进行至13~24h时，搅拌速度为400~450r/min；第三阶段：发酵时间进行至25~48h时，搅拌速度为300~350r/min；第四阶段：发酵时间进行至49~72h时，搅拌速度为200~250r/min。

7.根据权利要求1所述的一种产蛋鸡用复合有机微量元素饲料添加剂的制备方法，其特征在于：发酵培养基的PH值通过PH监测探头、数据线和控制仪表进行实时监测。

8.根据权利要求1所述的一种产蛋鸡用复合有机微量元素饲料添加剂的制备方法，其特征在于：步骤四中，离心后得到的湿菌体通过加入轻质碳酸钙混合均匀，轻质碳酸钙与湿菌体的重量比为1:1。