[发明专利]用于检测食道癌的组合物及其用途

权利要求书

1.一种用于体外检测食管癌的组合物，所述组合物包括：

用于检测目标基因甲基化状态的核酸，

其中，所述目标基因甲基化状态由所述目标基因靶序列的甲基化来表征，

其中，所述目标基因为MT1A基因、EPO基因和Septin9基因,

其中，所述MT1A基因的靶序列如SEQ ID NO:1所示,

其中，所述EPO基因的靶序列如SEQ ID NO:3所示,

其中，所述Septin9基因的靶序列如SEQ ID NO:5所示。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述用于检测目标基因甲基化状态的核酸包括：

引物，所述引物为所述目标基因的靶序列中的至少9个核苷酸的片段，所述片段包含至少一个CpG二核苷酸序列。

3.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述用于检测目标基因甲基化状态的核酸包括：

探针，所述探针为在中等严紧或严紧条件下杂交于所述目标基因靶序列中的至少15个核苷酸的片段，

所述片段包含至少一个CpG二核苷酸序列。

4.根据权利要求1所述的组合物，其还包括：

将目标基因靶序列的5位未甲基化胞嘧啶碱基转化为尿嘧啶的试剂。

5.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述用于检测目标基因甲基化状态的核酸还包括：

优先与处于非甲基化状态的靶序列结合的阻断剂。

6.根据权利要求5所述的组合物，其中，

所述至少9个核苷酸的片段，其为SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8的序列，以及SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12的序列，以及SEQ ID NO:15和SEQ ID NO:16的序列，

所述至少15个核苷酸的片段，其为SEQ ID NO:9的序列，以及SEQ ID NO:13的序列，以及SEQ ID NO:17的序列，

阻断剂，其为SEQ ID NO:10的序列，以及SEQ ID NO:14的序列，以及SEQ ID NO:18的序列。

7.MT1A基因的靶序列、EPO基因的靶序列和Septin9基因的靶序列三种在制备用于体外检测食管癌的试剂盒中的用途，

所述MT1A基因的靶序列如SEQ ID NO:1所示,

其中，所述EPO基因的靶序列如SEQ ID NO:3所示,

其中，所述Septin9基因的靶序列如SEQ ID NO:5所示。

8.一种试剂盒，其包括权利要求1～6中任一项所述的组合物。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其还包含选自下述的至少一种其它组分：

三磷酸核苷、DNA聚合酶和所述DNA聚合酶功能所需的缓冲液。

10.根据权利要求8或9所述的试剂盒，其还包含：说明书。

11.根据权利要求1～6中任一项所述的组合物在用于制备用于体外检测食管癌的试剂盒中的用途。

12.根据权利要求11所述的用途，其中，所述用于体外检测食管癌的试剂盒通过包括如下步骤的方法来检测食管癌：

分离待测生物样品中的包括目标基因靶序列或其片段的DNA样品；

确定所述目标基因靶序列的甲基化状态；以及

通过所述目标基因靶序列的甲基化状态的检测结果判断生物样品的状态，从而实现对食管癌的体外检测。