[发明专利]基于探针法实现维D受体TaqI位点准确分型的引物组合物、试剂、检测方法和系统在审
申请号: | 202010325748.4 | 申请日: | 2020-04-23 |
公开(公告)号: | CN111455029A | 公开(公告)日: | 2020-07-28 |
发明(设计)人: | 代冰;周梅华;余艳;龚强;陈鹏;李慧源;何媛 | 申请(专利权)人: | 长沙金域医学检验实验室有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6858 | 分类号: | C12Q1/6858;C12N15/11 |
代理公司: | 湖南中泽专利代理事务所(普通合伙) 43259 | 代理人: | 龙予倩 |
地址: | 410000 湖南省长沙市长沙高新开发区麓天*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 探针 实现 受体 taqi 准确 引物 组合 试剂 检测 方法 系统 | ||
1.一种基于探针法实现维D受体TaqI位点准确分型的引物组合物,包括根据维生素D受体基因TaqI(rs731236)SNP位点多态性设计的引物和探针,其特征在于:序列如下:
VDR基因TaqI(rs731236)正向扩增引物:
CGTGCCCACAGATCGTCCTG;
VDR基因TaqI(rs731236)反向扩增引物:
GATGTACGTCTGCAGTGTGTTGG;
VDR基因TaqI(rs731236)基因型T探针:
5’-GCTGATTGAGGCCATCCA-3’;
VDR基因TaqI(rs731236)基因型C探针:
5’-GCTGATCGAGGCCATCCA-3’。
2.根据权利要求1所述的基于探针法实现维D受体TaqI位点准确分型的引物组合物,其特征在于:所述基因型T探针5’端的荧光基团为VIC,3’端的淬灭基团为Quencher和MGB。
3.根据权利要求1所述的基于探针法实现维D受体TaqI位点准确分型的引物组合物,其特征在于:所述基因型C探针5’端的荧光基团为FAM,3’端的淬灭基团为Quencher和MGB。
4.根据权利要求1至3任一所述的基于探针法实现维D受体TaqI位点准确分型的引物组合物,其特征在于:引物和探针以混合液的形式存在,其比例为:(所述正向扩增引物:所述反向扩增引物:所述基因型T探针:所述基因型C探针:水)=(10:10:4:4:192)。
5.一种基于探针法实现维D受体TaqI位点准确分型的试剂,其特征在于:包括权利要求1至4任一所述的基于探针法实现维D受体TaqI位点准确分型的引物组合物,以及进行Q-PCR反应所需的试剂。
6.一种基于探针法实现维D受体TaqI位点准确分型的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤一:提取获得待测样本DNA;
步骤二:将所述待测样本DNA、权利要求1至4任一所述的基于探针法实现维D受体TaqI位点准确分型的引物组合物、以及Q-PCR反应试剂,按Q-PCR反应的步骤操作进行反应。
7.一种基于探针法实现维D受体TaqI位点准确分型的系统,其特征在于,包括:
提取模块,用于提取获得待测样本DNA;
检测模块,用于将所述待测样本DNA、权利要求1至4任一所述的基于探针法实现维D受体TaqI位点准确分型的引物组合物、以及Q-PCR反应试剂,按Q-PCR反应的步骤操作进行反应。
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