[发明专利]一种采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法

权利要求书

1.一种采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：具体步骤包括如下：

(1)卡马西平储备液的制备：取一定量的卡马西平，加甲醇溶解，制备得到卡马西平储备液；

(2)内标工作液：取一定量的D10-卡马西平，加80％甲醇溶解，制备得到内标工作液；

(3)取一定量的动物血清低温解冻，再平衡至室温备用；

(4)校准品溶液的制备：

取步骤(3)的动物血清加入一定量的卡马西平储备液，制备得到一定梯度浓度的多个卡马西平校准品溶液；

(5)质控品溶液的制备：

取步骤(3)的动物血清加入一定量的卡马西平储备液，制备得到一定梯度浓度的多个卡马西平质控品溶液；

(6)待测样品的前处理：

在室温条件下，分别准确吸取校准品溶液、质控品溶液、待测血清样本加入内标工作液，设置空白质控，经振荡混合后，离心取上清液，加入超纯水复溶，震荡混合后离心，封膜后为待测样品；

(7)设置液相色谱-质谱条件：

按照液相色谱条件和质谱条件进行液相色谱串联质谱参数的设置和优化；

(8)待测样品的检测：

经处理后的校准品溶液按照浓度由低到高顺序进行液相色谱串联质谱分析，将处理后的待测血清样本按进样量2μL进行液相色谱串联质谱分析；

(9)质量控制：对处理后的质控品溶液进行测定，若质控品溶液测定结果在理论值±15％范围内，则测定结果有效；质控品测定结果不在范围内，则测定结果无效，需重新定标再进行测定；

(10)根据校准品溶液浓度值、质控品溶液浓度值对卡马西平峰面积与内标峰面积的比例，建立线性方程，最终计算得到血清样本中卡马西平的浓度。

2.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述动物血清为小牛血清、新生牛血清、马血清、山羊血清、猪血清、狗血清或兔血清中的一种。

3.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述校准品溶液的梯度浓度为每毫升分别含卡马西平0.5μg、1.0μg、3.0μg、10μg、15μg和20μg。

4.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述质控品溶液的梯度浓度为1.2μg、8.0μg和18μg。

5.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述空白质控包含2个复孔，在空白质控孔1内加入250μL80％的甲醇溶液；在空白质控孔2内加入250μL内标工作液。

6.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述步骤(6)中离心条件为：温度为4℃，离心速度为4000rpm，离心时间为5min。

7.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述步骤(7)中液相色谱条件为：色谱柱采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18，柱温为40℃。

8.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述步骤(7)中液相色谱的流动相A为0.5％乙酸水溶液，流动相B为乙腈，采用梯度洗脱的方式，流速为0.4mL/min。

9.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述步骤(7)中质谱条件为：采用喷雾离子源(ESI)，正离子模式，毛细管电压为2.5kV，雾化压力为7.0Bar。

10.如权利要求1所述的采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，其特征在于：所述步骤(7)中质谱条件为：去溶剂化温度为600℃，去溶剂化流速为1000L/Hr，锥孔流速为150L/Hr。