[发明专利]一种鉴别肺腺癌circ_0065214的特异性引物及其试剂盒及其用途

说明书

本发明公开了一种鉴别肺腺癌circ_0065214的特异性引物，其特征在于，所述特异性引物对应的接头序列为：AATGGCGGCTACCCACTGC；所述特异性引物为：F：CTCAGCTCGCTGCTCATGTC；R：GGGGCACCCACATACCACT。本发明还公开了包含所述特异性引物的试剂盒和用途。本发明首次提出了针对肺腺癌circ_0065214的特异性引物以及试剂盒，具有特异性强，灵敏度高的特点。批量检测效率高，且可广泛应用于临床肺腺癌的检测，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种鉴别肺腺癌circ_0065214的特异性引物及其试剂盒及其用途。

背景技术

肺癌是我国乃至全世界最常见的恶性肿瘤之一。近年来，虽然手术方式、化疗药物及靶向治疗方案的不断更新，肺癌仍位居世界肿瘤相关性死亡原因的首位，是威胁人类健康的重大问题。肺癌根据其病理类型可分为小细胞肺癌(small cell lung cancer，SCLC，约占15％)和非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC，约占85％)，其中肺腺癌(LAD)是NSCLC最主要的病理类型。

临床研究表明，I期肺腺癌患者的5年生存率达60％～90％，而IIIB和IV患者5年生存率仅为5％～20％，故肺腺癌的早期诊断是改善其预后的关键。目前临床上用于LAD早期诊断的检查方法有很多，如胸部CT、支气管镜、肿瘤标记物等，但这些方法由于敏感性、特异性、有创、辐射等因素并不理想。因此，寻找新的肺腺癌诊断标记物，并对其作用机制的研究是提高肺癌患者生存率和治愈率的关键。

近些年得益于分子生物学技术的不断发展，ENCODE计划研究结果表明人类基因组中只有＜5％的基因编码蛋白质，提示基因组中非编码区域也可能参与调控复杂的生物学过程。后续研究证实，这类基因的产物-非编码RNA(noncoding RNA，ncRNA)的异常表达参与人类多种疾病的发生发展，特别是与恶性肿瘤的发生、发展以及转移密切相关。随着研究的完善，非编码RNA应用于肿瘤诊断和治疗的临床试验也逐步开展。

环状RNA(circular RNA，circRNA)作为ncRNA家族的一重要成员，是一类不具有5’末端帽子和3’末端poly A尾巴结构，呈共价闭合环状结构的非编码RNA分子，能较高程度耐受核糖核酸外切酶(RNase)降解，故比lncRNA或mRNAs等线性RNAs分子更稳定。

文献报道肿瘤细胞来源的circRNA分子可通过外泌体分泌至组织间隙及肿瘤患者体液中，如血浆、尿液等，受外泌体脂质分子的保护，体液标本中的circRNA稳定存在，半衰期长，可作为肿瘤诊断、预后的分子标志物，是目前RNA研究的热点。

发明内容

为了克服现有技术的上述缺陷，本发明的目的之一在于通过前期预实验结果提示在肺腺癌患者组织标本和肺腺癌细胞系中circ_0065214表达升高，可作为肺腺癌诊断的分子标记物，而提供一种鉴别肺腺癌circ_0065214的特异性引物。

本发明的目的之二在于提供一种鉴别肺腺癌circ_0065214的特异性引物的试剂盒。

本发明的目的之三在于提供一种鉴别肺腺癌circ_0065214的特异性引物试剂盒用途。

为了实现本发明的目的之一，所采用的技术方案是：

一种鉴别肺腺癌circ_0065214的特异性引物，其中，所述特异性引物对应的接头序列为：

AATGGCGGCTACCCACTGC(接头序列)；

所述特异性引物为：

F：CTCAGCTCGCTGCTCATGTC(Forward primer)；

R：GGGGCACCCACATACCACT(Reverse primer)。