[发明专利]细胞发酵液的澄清处理方法及抗体的分离纯化方法

权利要求书

1.细胞发酵液的澄清处理方法，其特征在于，包括如下步骤：

采用深层过滤的方式对含目标抗体的细胞发酵液进行澄清处理，收集滤出液；其中，预先调节所述发酵液的pH至4.5～7.0。

2.根据权利要求1所述的细胞发酵液的澄清处理方法，其特征在于，预先调节所述发酵液的pH至5.3～5.7。

3.根据权利要求1或2所述的细胞发酵液的澄清处理方法，其特征在于，采用醋酸溶液对所述发酵液的pH进行调节；

优选的，所述醋酸溶液的浓度为0.5～2mol/L。

4.根据权利要求1或2所述的细胞发酵液的澄清处理方法，其特征在于，所述深层过滤包括初级深层过滤和二级深层过滤；

可选的，分别通过初级深层过滤器和二级深层过滤器实现所述初级深层过滤和所述二级深层过滤。

5.根据权利要求4所述的细胞发酵液的澄清处理方法，其特征在于，所述初级深层过滤器和所述二级深层过滤器串联连接；

优选的，所述初级深层过滤器为Millipore D0HC，所述二级深层过滤器为MilliporeA1HC；

优选的，所述初级深层过滤器和所述二级深层过滤器的膜面积比为(1～4)﹕1。

6.根据权利要求4所述的细胞发酵液的澄清处理方法，其特征在于，所述初级深层过滤器的通量为50～300LMH；所述二级深层过滤器的通量为50～300LMH；

优选的，所述初级深层过滤器的通量为80～120LMH；所述二级深层过滤器的通量为80～120LMH。

7.抗体的分离纯化方法，其特征在于，先采用权利要求1-6任一项所述的细胞发酵液的澄清处理方法进行澄清处理后，对所述滤出液进行阳离子交换层析处理。

8.根据权利要求7所述的抗体的分离纯化方法，其特征在于，所述阳离子交换层析的介质包括POROS 50HS、Capto S Impact和POROS XS中的任一种或多种；

优选的，所述阳离子交换层析的介质为POROS 50HS。

9.根据权利要求7或8所述的抗体的分离纯化方法，其特征在于，所述阳离子交换层析处理中，采用的平衡缓冲液为醋酸钠-醋酸缓冲溶液，采用的洗脱液为含氯化钠的醋酸钠-醋酸缓冲溶液；

优选的，所述平衡缓冲液的pH为4.8～6.0；

更优选的，所述平衡缓冲液的pH为5.4～5.6；

优选的，所述平衡缓冲液的浓度为45～55mM；

更优选的，所述平衡缓冲液的浓度为50～55mM；

优选的，所述洗脱液中氯化钠浓度为300～1000mM；

更优选的，所述洗脱液中氯化钠浓度为500mM。

10.根据权利要求9所述的抗体的分离纯化方法，其特征在于，采用阳离子交换层析的柱高为15～25cm；

优选的，所述阳离子交换层析处理的线性流速为150～300cm/h；

优选的，所述阳离子交换层析处理的线性流速为180～210cm/h；

优选的，在所述阳离子交换层析处理上样后，采用所述平衡缓冲液对阳离子交换层析柱平衡处理3～5CV；

优选的，在所述阳离子交换层析淋洗后，采用所述洗脱液对阳离子交换层析柱线性洗脱处理10～12CV。