[发明专利]抗衰老小肽及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种抗衰老小肽及其制备方法和应用，属于天然活性成分技术领域。该抗衰老小肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。抗衰老小肽，对D‑半乳糖诱导的PC12细胞衰老模型具有保护作用，且通过实验进一步验证了其具有较好的抗衰老活性，可广范用于延缓衰老产品中。

技术领域

本发明涉及天然活性成分技术领域，特别是涉及一种抗衰老小肽及其制备方法和应用。

背景技术

鹿骨为鹿科动物梅花鹿或马鹿的骨骼，营养物质丰富。由于中国东北养殖着数量可观的各种鹿，鹿骨可以被广泛的用来研究，从鹿骨中提取鹿骨肽成为一条可行性道路。近年来有大量研究证实，鹿骨多肽可延缓衰老，并有祛风除湿之功效对四肢疼痛有明显临床疗效，对人体无毒副作用，具有水溶性强、活性高等特点，可作为天然活性蛋白多肽的可靠来源。

众所周知，衰老是生命必然经历的复杂过程，它是一种退行性的变化，也是一种不可逆的变化，它涉及到机体的不同细胞、组织。如今社会人口老龄化越来越严重，有数据显示：截至2017年末，中国60岁以上的人口己经占全国人口比例的17.3％，而且预计该比例在未来的三十年中将会提高一倍。衰老不仅直接导致各器官功能发生障碍，而且还是促使许多疾病发生的催化剂。而且随着人口的老龄化，认知功能障碍等与年龄相关性疾病的发病率越来越高，给个人、家庭及社会带来巨大的压力。

衰老不可以避免，然而延缓衰老却是可能的，因此，如何延缓衰老成为当今研究的重点，以及亟待攻克的难题。

发明内容

基于此，有必要针对上述问题，提供一种抗衰老小肽，该多肽具有抗衰老的作用，且为小分子肽类成分，易于机体吸收利用。

一种抗衰老小肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

上述抗衰老小肽，为11个氨基酸组成的小肽，其氨基酸序列为GPPGPMGPPGL，对D-半乳糖诱导的PC12细胞衰老模型具有保护作用，且通过实验进一步验证了其抗衰老活性，可广范用于延缓衰老产品中。

在其中一个实施例中，所述多肽由鹿骨提取得到。

本发明还公开了一种编码权利要求1所述多肽的表达基因，所述表达基因的序列为：

A)由编码SEQ ID NO:1所示氨基苷酸的核苷酸序列构成；或者

B)与A)的核苷酸序列编码相同序列的肽段，但因遗传密码的简并性而与A)的核苷酸序列不同的序列；或者

C)对上述A)或B)所示核苷酸序列进行一个或多个碱基的取代、缺失、添加修饰的核苷酸序列。

本发明还公开了一种表达载体，为具有上述表达基因的表达载体。如质粒、大肠杆菌等，可利用生物工程制备生产上述抗衰老小肽。

本发明还公开了上述抗衰老小肽的制备方法，包括以下步骤：

脱脂脱钙：将鹿骨粉碎后，以石油醚进行脱脂处理，随后以盐酸进行脱钙处理；

提取：将经脱脂脱钙处理的鹿骨以水为溶剂，加热提取得提取液，在提取液中加入硫酸铵沉淀蛋白，离心取沉淀蛋白，蒸馏水复溶后透析除盐，冻干，得到鹿骨蛋白；

酶解：取上述鹿骨蛋白，先以胃蛋白酶酶解，再以胰蛋白酶酶解，得到鹿骨粗多肽；

分离纯化：将上述鹿骨粗多肽上样于Sephadex G-50葡聚糖凝胶柱，以水为流动相进行粗分离；再上样于DEAE-32纤维素离子交换层析柱，以NaCl溶液梯度洗脱进行再分离；最后以Superdex30凝胶柱为固定相，水为流动相进行分离纯化，即得。