[发明专利]基于探针法实现维D受体ApaI位点准确分型的引物组合物、试剂、检测方法和系统

权利要求书

1.一种基于探针法实现维D受体ApaI位点准确分型的引物组合物，包括根据维生素D受体基因ApaI(rs7975232)SNP位点多态性设计的引物和探针，其特征在于，序列如下：

VDR基因ApaI(rs7975232)正向扩增引物：

GTGGGCACGGGGATAGAGAAG；

VDR基因ApaI(rs7975232)反向扩增引物：

CGTTGAGTGTCTGTGTGGGTG；

VDR基因ApaI(rs7975232)基因型A探针：

5’-CAGCTGGGCACCTCACTG-3’；

VDR基因ApaI(rs7975232)基因型C探针：

5’-CAGCTGGGC[A/C]CCTCACTG-3’。

2.根据权利要求1所述的基于探针法实现维D受体ApaI位点准确分型的引物组合物，其特征在于：所述基因型A探针5’端的荧光基团为VIC，3’端的淬灭基团为Quencher和MGB。

3.根据权利要求1所述的基于探针法实现维D受体ApaI位点准确分型的引物组合物，其特征在于：所述基因型C探针5’端的荧光基团为FAM，3’端的淬灭基团为Quencher和MGB。

4.根据权利要求1至3任一所述的基于探针法实现维D受体ApaI位点准确分型的引物组合物，其特征在于：引物和探针以混合液的形式存在，其比例为：(所述正向扩增引物：所述反向扩增引物：所述基因型A探针：所述基因型C探针：水)＝(10:10:4:4:192)。

5.一种基于探针法实现维D受体ApaI位点准确分型的试剂，其特征在于：包括权利要求1至4任一所述的基于探针法实现维D受体ApaI位点准确分型的引物组合物，以及Q-PCR反应所需的试剂。

6.一种基于探针法实现维D受体ApaI位点准确分型的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一：提取获得待测样本DNA；

步骤二：将所述待测样本DNA、权利要求1至4任一所述的基于探针法实现维D受体ApaI位点准确分型的引物组合物、以及Q-PCR反应试剂，按Q-PCR反应的步骤操作进行反应。

7.一种基于探针法实现维D受体ApaI位点准确分型的系统，其特征在于，包括：

提取模块，用于提取获得待测样本DNA；

检测模块，用于将所述待测样本DNA、权利要求1至4任一所述的基于探针法实现维D受体ApaI位点准确分型的引物组合物、以及Q-PCR反应试剂，按Q-PCR反应的步骤操作进行反应。