[发明专利]抗PTN抗体在抑制白血病干细胞以及治疗慢性粒细胞白血病中的应用

说明书

本发明涉及一种抗PTN抗体在抑制白血病干细胞以及治疗慢性粒细胞白血病中的应用，所述抗PTN抗体能够以较高的亲和力结合PAI‑1蛋白，能够抑制CML干细胞的植入，能够抑制CML细胞生长，能够用于预防或治疗慢性粒细胞白血病，有着广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体的涉及抗PTN抗体在抑制白血病干细胞以及治疗慢性粒细胞白血病中的应用。

背景技术

慢性粒细胞性白血病（chronic myelocytic leukemia,CML）是骨髓造血干细胞异常增殖形成的恶性肿瘤。起病较慢，以脾脏增大、外周血粒细胞明显增多为特征，第 9 号染色体和 22 号染色体的易位，形成费城染色体（Philadelphia chromosome，Ph）,进而编码产生 BCR-ABL1 融合基因是其特殊性生物学标志，最终导致白血病干细胞（leukemia stemcell，LSC）的形成[1-3]。由于 BCR-ABL1 致癌蛋白具有持续激活的酪氨酸激酶活性，可诱导白血病细胞增殖失控、凋亡抑制，引起慢性粒细胞白血病的发生发展[4]。

目前CML主要是通过酪氨酸激酶抑制剂（tyrosine kinase inhibitors，TKIs）进行治疗。但 TKIs 治疗一旦中止，疾病常常会复发，说明 TKIs 只能抑制但不能将疾病治愈[5-7]。后续研究证明CML停药后复发与患者体内的白血病干细胞的持续存在有关。各项研究证明TKIs只能杀死处于分裂增殖状态的白血病细胞，并不能清除处于静止休眠期的慢粒白血病干细胞[8-11]，这也是导致CML复发的关键原因。因此，清除白血病干细胞成为完全治愈慢性粒细胞白血病的关键点，也是当前慢性粒细胞白血病研究的热点[12]。

现研究表明多效生长因子（pleiotrophin ，PTN）在慢性粒细胞白血病干细胞的生长、存活以及慢性粒细胞白血病疾病发展过程中起到重要作用[13]。多效生长因子是Bohlen等在 20 世纪 80 年代从成年牛脑中分离纯化出的一种蛋白质，因为这种蛋白质可以与肝素结合因此称其为肝素结合生长因子。之后因其具有多种功能而被重新命名为多效生长因子。实验研究表明，PTN 与细胞增殖与迁移[14]、肿瘤生长[15]、细胞分化[16, 17]等功能有关。除此之外，研究表明小鼠CML干细胞中PTN的表达上调、分泌增多[18]；TKIs处理后小鼠CML干细胞中PTN表达上调，且PTN以依赖c-Jun 和UPR基因活化的方式诱导CML干细胞的生长和存活，表明PTN基因表达可能是TKIs处理后，CML干细胞仍然存活的原因[13]。因此可通过靶向PTN，达到清除CML干细胞以及完全治愈慢性粒细胞白血病的目的。

到目前为止，已有PTN抗体在US20040234519专利中提及，但一方面它们对PTN的结合能力还并不十分理想，另一方面，它也没有用来治疗慢性粒细胞白血病。

发明内容

为了克服现有技术的上述缺陷，本发明的目的在于提供一种新的且具有更高PTN结合能力的抗PTN抗体，为治愈慢性粒细胞白血病提供一种新可能性。

本发明提供以下技术方案：

一种PTN抗体，由重链和轻链组成，重链和轻链分别包括可变区和恒定区，其中重链可变区包含3个互补决定区，分别命名为VH-CDR1，VH-CDR2,VH-CDR3；同样地，轻链可变区也包含3个互补决定区，分别命名为VL-CDR1,VL-VDR2,VL-CDR3 。所述PTN抗体的重链包含如SEQ ID NO:1所示的VH-CDR1氨基酸序列，和如SEQ ID NO:2所示的VH-CDR2氨基酸序列，和如SEQ ID NO:3所示的VH-CDR3氨基酸序列；所述PTN抗体的轻链包含如SEQ ID NO:4所示的VL-CDR1氨基酸序列，和如SEQ ID NO:5所示的VL-CDR2氨基酸序列，和如SEQ ID NO:6所示的VL-CDR3氨基酸序列。

本发明所述PTN抗体包含SEQ ID NO :7 所示的重链可变区和SEQ ID NO :8 所示的轻链可变区。