[发明专利]Lsa-MIR408基因及其在调控生菜产量及种子大小中的应用

说明书

本发明公开了一种Lsa‑MIR408基因及其在调控生菜产量及种子大小中的应用。本发明利用高通量测序技术对生菜进行了系统地小RNA测序，通过基因工程手段将候选基因Lsa‑MIR408过表达到生菜中，观察了生菜的表型，研究结果表明，过表达Lsa‑MIR408可促进生菜营养生长、提高生菜产量及改变生菜种子大小。本发明对于生菜产量提高及生菜育种有重要意义。

技术领域

本发明涉及Lsa-MIR408基因及其在调控生菜产量及种子大小中的应用。

背景技术

生菜(Lactuca sativa L.)为全球消费量最大的叶用蔬菜之一，在世界大多地区被广泛种植。生菜因发生病虫害几率低，农药残留少等特征，满足了目前大众对无公害蔬菜的青睐而深受大众喜爱。近年来，在我国市场对生菜需求量急剧增加，种植面积也不断扩大，生菜产量低，市场供应不足等问题很突出。因此，寻找提高生菜产量的关键基因至关重要。

发明内容

本发明的目的是提供一种Lsa-MIR408基因及其在调控生菜产量及种子大小中的应用。

本发明提供一种miRNA，命名为Lsa-MIR408，来源于美国大速生菜，如SEQ ID No.1所示。本发明还保护一种RNA(Lsa-MIR408的前体，简称Lsa-MIR408前体)，如序列表的序列SEQ ID No.3所示。

编码所述Lsa-MIR408的DNA分子也属于本发明的保护范围。

所述DNA分子具体可为如下(a1)或(a2)或(a3)：

(a1)SEQ ID No.2所示的DNA分子；

(a2)在严格条件下与(a1)限定的DNA序列杂交且具有相同功能的DNA分子；

(a3)与(a1)限定的DNA序列具有90％以上同源性且具有相同功能的DNA分子。

编码所述Lsa-MIR408前体的DNA分子也属于本发明的保护范围。

所述DNA分子具体可为如下(b1)或(b2)或(b3)：

(b1)SEQ ID No.4所示的DNA分子；

(b2)在严格条件下与(b1)限定的DNA序列杂交且具有相同功能的DNA分子；

(b3)与(b1)限定的DNA序列具有90％以上同源性且具有相同功能的DNA分子。

上述严格条件可为用0.1×SSPE(或0.1×SSC)，0.1％SDS的溶液，在DNA或者RNA杂交实验中65℃下杂交并洗膜。

含有以上任一所述DNA分子的重组表达载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌均属于本发明的保护范围。

所述重组载体可为在植物表达载体的多克隆位点或重组位点插入以上任一所述DNA分子得到重组质粒。所述重组载体具体可为将植物表达载体pJIM19的XbaI和XhoI之间的小片段取代为SEQ ID No.5得到的重组质粒。

本发明还保护本发明还保护所述Lsa-MIR408、所述Lsa-MIR408前体或以上任一所述DNA分子的应用，为如下(c1)、(c2)、(c3)或(c4)：

(c1)调控植物生长速度；

(c2)调控植物产量；

(c3)促进植物生长；

(c4)提高植物产量。