[发明专利]基于POCT模式的新型冠状病毒COVID-19快速检测试剂盒

权利要求书

1.新型冠状病毒COVID-19检测引物，其特征在于，包括COVID-19 1ab基因检测引物和COVID-19N基因检测引物；COVID-19 1ab基因检测引物包括如SEQ ID NO:1所示的上游引物和序列如SEQ ID NO:2所示的下游引物，COVID-19N基因检测引物包括如SEQ ID NO:4所示的上游引物和序列如SEQ ID NO:5所示的下游引物。

2.与权利要求1所述引物配套使用的探针，其特征在于，与COVID-19 1ab基因检测引物配套使用的探针序列如SEQ ID NO:3所示，与COVID-19N基因检测引物配套使用的探针序列如SEQ ID NO:6所示，SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:6所示探针的5′端分别带有相同的荧光基团，3′端具有淬灭基团。

3.含有权利要求1所述引物和/或权利要求2所述探针的检测试剂或试剂盒。

4.基于POCT模式的新型冠状病毒COVID-19快速检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述引物和权利要求2所述探针。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包含内参基因GAPDH检测引物和探针，其中，GAPDH检测引物包括序列如SEQ ID NO:7所示的上游引物和序列如SEQID NO:8所示的下游引物；GAPDH检测探针的序列如SEQ ID NO:9所示，探针的5′端具有荧光基团，3′端具有淬灭基团，且该荧光基团不同于权利要求2所述探针中使用的荧光基团。

6.根据权利要求5所述的试剂盒，其特征在于，SEQ ID NO:3所示探针的5′端荧光基团为FAM，SEQ ID NO:3所示探针的3′端淬灭基团为BHQ1；和/或

SEQ ID NO:6所示探针的5′端荧光基团为FAM，SEQ ID NO:6所示探针的3′端淬灭基团为BHQ1；和/或

SEQ ID NO:9所示探针的5′端荧光基团为Texas Red，SEQ ID NO:9所示探针的3′端淬灭基团为BHQ2。

7.根据权利要求4-6任一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括裂解液、Tth酶体系、RNA酶抑制剂、标准阳性模板中的至少一种；

其中，裂解液的成分为：十二烷基硫酸钠0.005％w/v、聚乙二醇辛基苯基醚0.01％w/v和Tris-HCl 30mM。

8.用于检测新型冠状病毒COVID-19的qPCR反应体系，其特征在于，包括用于检测COVID-19 1ab基因的qPCR反应体系以及用于检测COVID-19N基因的qPCR反应体系；

用于检测COVID-19 1ab基因的qPCR反应体系包含：1.2×Tth酶体系，0.3U/μl RNA酶抑制剂，SEQ ID NO:1所示的上游引物、SEQ ID NO:2所示的下游引物各0.7μM，SEQ ID NO:7所示的上游引物、SEQ ID NO:8所示的下游引物各0.3μM，SEQ ID NO:3所示的探针0.3μM，SEQID NO:9所示的探针0.2μM以及裂解液；所述裂解液在体系中加入的浓度为1×；

用于检测COVID-19N基因的qPCR反应体系包含：1.2×Tth酶体系，0.3U/μl RNA酶抑制剂，SEQ ID NO:4所示的上游引物、SEQ ID NO:5所示的下游引物各0.7μM，SEQ ID NO:7所示的上游引物、SEQ ID NO:8所示的下游引物各0.3μM，SEQ ID NO:6所示的探针0.3μM，SEQ IDNO:9所示的探针0.2μM以及裂解液；所述裂解液在体系中加入的浓度为1×；

其中，所述裂解液使用权利要求7中所述的裂解液。