[发明专利]象牙及其制品的DNA快速鉴定方法有效
| 申请号： | 202010333923.4 | 申请日： | 2020-04-24 |
| 公开（公告）号： | CN111455069B | 公开（公告）日： | 2022-05-27 |
| 发明（设计）人： | 邵碧英;陈文炳;彭娟;缪婷玉 | 申请（专利权）人： | 福州海关技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12N15/10;C12Q1/6806;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 饶文君;蔡学俊 |
| 地址： | 350003 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 象牙 及其 制品 dna 快速 鉴定 方法 | ||
1.象牙及其制品的DNA快速鉴定方法，其特征在于：将象牙及其制品研磨成粉，称取400mg粉末于50 mL离心管中，加3 mL EDTA溶液，轻摇混匀，37 ℃、500 W超声脱钙处理2 h，12000 rpm离心10 min，沉淀用于提取DNA，DNA再用于SYBR Green实时荧光PCR鉴定。
2.根据权利要求1所述的象牙及其制品的DNA快速鉴定方法，其特征在于：PCR反应体系：SYBR Premix Ex Taq（2×） 12.5 μL，10 μmol/L引物Cytb-F、Cytb-R1各0.5 μL，DNA原液5 μL，ddH2O补足至25 μL；反应条件：95 ℃ 30 s；95 ℃ 5 s，55 ℃ 35 s，45个循环；65℃~95 ℃熔解曲线分析；PCR产物的确证：将有扩增曲线和熔解曲线且熔解温度为82.00℃±0.5 ℃的实时荧光PCR产物进行序列测定，将测序结果进行NCBI-BLAST比对，根据同源率达到98.5%以上为同种来判定象牙及其制品所属物种的种类。
3.根据权利要求2所述的象牙及其制品的DNA快速鉴定方法，其特征在于：所述引物Cytb-F为5′-TGA GGA CAA ATA TCA TTC TGA GGG G-3′，Cytb-R1为5′-GGA CAC CTC CTAGTT TGT TTG GT-3′。
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