[发明专利]一种甲砜霉素半抗原、抗原及其化学发光酶联免疫检测试剂盒与应用有效
申请号: | 202010333952.0 | 申请日: | 2020-04-24 |
公开(公告)号: | CN111592476B | 公开(公告)日: | 2022-06-03 |
发明(设计)人: | 谭庶;杨金易;曾道平;钟翠丽;唐莲;李段;苏晓娜 | 申请(专利权)人: | 温氏食品集团股份有限公司;新兴县国研科技有限公司 |
主分类号: | C07C317/32 | 分类号: | C07C317/32;C07C315/04;C07K14/765;C07K1/113;C07K16/44;G01N33/53;G01N33/68 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人: | 李小婷 |
地址: | 527499 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 霉素 半抗原 抗原 及其 化学 发光 免疫 检测 试剂盒 应用 | ||
1.一种甲砜霉素半抗原,其特征在于,其分子结构式如式(I)所示:
2.权利要求1所述甲砜霉素半抗原的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1.将甲砜霉素与戊二酸酐加入高氯酸中,加热进行回流反应,得到产物A;所述回流反应的条件为40~50℃反应12~20h;
S2.将产物A溶于有机溶剂中,加入N-羟基琥珀酰亚胺和1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐,室温条件下搅拌反应,得到产物B;
S3.将产物B溶于四氢呋喃溶液中,获得产物B溶液;将对氨甲基苯甲酸溶液滴入产物B溶液中,加入碱调节pH为8~10,室温条件下搅拌反应,得到所述甲砜霉素半抗原;S2中,所述有机溶剂为二氯甲烷、二氯乙烷或氯仿。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,S1中,控制甲砜霉素与戊二酸酐的摩尔比为1~3:2;S2中,控制产物A与N-羟基琥珀酰亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐的摩尔比为1:1~3:1~3;S2搅拌反应时间为16~20h;S3中,控制产物B与对氨甲基苯甲酸的摩尔比为1:0.5~1.5;S3搅拌反应时间为2~4h。
4.一种甲砜霉素抗原,其特征在于,由权利要求1所述甲砜霉素半抗原或权利要求2或3所述制备方法制得的甲砜霉素半抗原,与载体蛋白偶联反应得到。
5.根据权利要求4所述的甲砜霉素抗原,其特征在于,所述载体蛋白包括牛血清白蛋白、人血清白蛋白、卵清蛋白、兔血清白蛋白、鼠血清白蛋白或甲状腺球蛋白中的一种或几种。
6.权利要求4或5所述甲砜霉素抗原的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S11.按摩尔比1~5:2~10:2~10将所述甲砜霉素半抗原、二环己基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺溶于N,N-二甲基甲酰胺中,4~8℃搅拌反应12~24h,离心取上清,得到甲砜霉素半抗原反应液;
S12.将载体蛋白溶于磷酸盐缓冲液中,得到载体蛋白溶液;
S13.在搅拌条件下,将甲砜霉素半抗原反应液逐滴加入载体蛋白溶液中,4~8℃搅拌反应过夜;
S14.离心取上清液,在2~4℃下用磷酸盐缓冲液透析2~3d,期间每天换液2~3次,得到所述甲砜霉素抗原。
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