[发明专利]一种基于DNA纳米结构的多色荧光探针及其制备方法以及应用

权利要求书

1.一种基于DNA纳米结构的多色荧光探针在单分子水平靶标有序识别和肿瘤细胞多色成像中的应用，其特征在于，所述应用包括：

构建手臂链数量不同的DNA四面体；以逐层组装或分形组装的策略构建DNA纳米自组装结构，所述DNA纳米自组装结构是由多个DNA四面体通过手臂链的杂交形成的二维平面或三维立体的DNA纳米结构，所述DNA纳米自组装结构包括DNA四面体、DNA立方体、DNA三角双锥、DNA八面体、DNA二十面体以及DNA折纸，通过在DNA纳米自组装结构上标记不同种类和数量的荧光分子，所述荧光分子包括Alexa488、ROX以及Cy5，从而构建一种基于DNA纳米自组装结构的多色荧光探针；

通过将所述基于DNA纳米自组装结构的多色荧光探针采用生物素和亲和素结合的手段修饰在玻璃表面皿，即可在全内反射荧光显微镜中观察该荧光探针与目标序列的有序分子识别；以及

将所述基于DNA纳米自组装结构的多色荧光探针分别标记上AS1411、SYL3C和sgc8核酸适配体，然后通过将分别标记有核酸适配体的多色荧光探针与MCF7，Hela 和 Hek293 三种不同的肿瘤细胞孵育，即可在全内反射荧光显微镜中观察该多色荧光探针在不同肿瘤细胞中的成像情况，从而识别不同的肿瘤细胞。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，在构建手臂链数量不同的DNA四面体时，所述手臂链的位置包含5’端、3’端或中间任意位置。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述荧光分子的标记方法包括共价、嵌入、配位中的任意一种或者多种。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，制备DNA四面体时所采用的缓冲体系包括氯化镁和Tris-HCl。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述逐层组装或分形组装是指将手臂链数量不同的DNA四面体按照一定的计量比在摇床中孵育组装。