[发明专利]一种三叶青药材中山柰酚-3-O-芸香糖苷含量的测定方法

说明书

本发明提供了一种三叶青药材中山柰酚‑3‑O‑芸香糖苷含量的测定方法，属于化学检测技术领域。本发明使用高效液相色谱法对三叶青药材中山柰酚‑3‑O‑芸香糖苷的含量进行测定，取样量小、提取溶剂用量少、提取溶液不需要浓缩，测定方法简便快速且重复性好，能够对三叶青药材的质量进行准确评价。实施例结果表明，本发明方法所得谱图山柰酚‑3‑O‑芸香糖苷峰与其他峰的分离度大于1.5，说明其分离度好；在线性关系试验中，本发明测定方法进样量在0.004～0.12μg范围内线性关系良好；在重复性试验中，本发明测定方法山柰酚‑3‑O‑芸香糖苷含量的相对标准偏差为2.76％，说明本发明方法重复性良好。

技术领域

本发明涉及药物中间体生产技术领域，特别涉及一种三叶青药材中山柰酚-3-O-芸香糖苷含量的测定方法。

背景技术

三叶青(Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg)为葡萄科三叶崖爬藤属多年生常绿藤本植物，是我国特有的珍稀药用植物。三叶青具有清热解毒、消肿止痛、化痰散结的功效，用于治疗高热惊厥、肺炎、肝炎、毒蛇咬伤等症。三叶青主要分布在浙江、江西、福建、湖南、广西、贵州等地。

目前，三叶青药材的质量控制成分为三叶青中黄酮类物质。使用高效液相色谱法对三叶青中黄酮类成分进行测定时，由于三叶青中黄酮类成分种类较多，需要的样品取样量较大，为3.0～4.0g；提取溶剂用量多，为40～50mL，且提取后溶液需要浓缩，测定方法较为繁琐。因此，需要寻找一种新的三叶青药材质量控制成分及其测定方法，以降低样品取样量和提取溶剂用量，并简化测定过程。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种三叶青药材中山柰酚-3-O-芸香糖苷含量的测定方法。本发明通过对三叶青药材中山柰酚-3-O-芸香糖苷进行高效液相色谱测试，取样量小，提取溶剂用量少，方法简单，且能够对三叶青药材的质量进行准确评价。

为了实现上述发明的目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种三叶青药材中山柰酚-3-O-芸香糖苷含量的测定方法，包括以下步骤：

(1)将三叶青粉末与甲醇混合，依次进行超声提取和微滤，所述微滤得到的滤液为供试品溶液；所述三叶青粉末的质量为0.11～0.22g，所述甲醇的体积为5～10mL；

(2)取样所述供试品溶液进行高效液相色谱测试，得到供试品液相色谱测试结果；

所述高效液相色谱测试的条件包括：

色谱柱为CAPCELL PAK C18，所述色谱柱的柱长为250mm，柱径为4.6mm，填料粒径为5μm；

所述高效液相色谱的柱温为30℃；

所述高效液相色谱的流动相A为乙腈，流动相B为纯水；所述流动相A和B的流速为1.0mL/min；

所述流动相的洗脱方式为梯度洗脱，所述梯度洗脱的程序为：

0min时，流动相A与B的体积比为15：85；

30min时，流动相A与B的体积比为30：70；

(3)根据预定的标准曲线和所述步骤(2)得到的供试品液相色谱测试结果，得到所述供试品溶液的理论进样量，所述标准曲线为山柰酚-3-O-芸香糖苷对照品进样量与液相色谱峰面积之间的线性关系曲线；

(4)根据所述步骤(3)得到的理论进样量和所述步骤(2)的实际进样量，得到三叶青药材中山柰酚-3-O-芸香糖苷的含量。

优选的，所述三叶青粉末的粒度≥40目。

优选的，所述超声提取的功率为300～400W，频率为40kHz，时间为50～60min。