[发明专利]一种诱导芍药花粉胚胎发生的方法

权利要求书

1.一种诱导芍药花粉胚胎发生的方法，其特征在于， 包括如下步骤：

1）采集芍药花蕾，低温预处理，再进行消毒处理；

2）将步骤1）所得花药接种到愈伤组织诱导培养基上，于温度23±2℃条件下，先黑暗培养3～15 d，再在光照条件1～500Lx下弱光培养60～90 d，诱导出胚性愈伤组织；

3）将胚性愈伤组织移至体细胞胚分化培养基中培养30～40 d；

4）挑选子叶胚或者具有胚根、胚轴和子叶的体胚，接种到成苗培养基进一步培养，诱导真叶形成，最后获得具备根、茎、叶的完整植株；

所述的愈伤组织诱导培养基为：MS +2,4-D 1～2 mg/L+NAA 0～1 mg/L +KT 0～1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L，其中NAA和KT的浓度不同时为0；

所述的体细胞胚分化培养基为：MS +KT 0～2 mg/L+IAA 0～1 mg/L+椰汁150ml/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L，其中KT和IAA的浓度不同时为0；培养条件为：温度23±2℃，光照周期12h/d，光照强度500～1000Lx；

所述的成苗培养基为①WPM +BA 0.2～1.0 mg/L+IAA 0.2～1.0 mg/L + GA₃ 0.5～2.0mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L，或者②WPM +BA 0.2～1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L，或者③WPM + IAA 0.2～1.0 mg/L + GA₃ 0.5～2.0 mg/L +蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L；培养条件为：温度23±2℃，光照周期12h/d，光照强度2000～3500Lx。

2.如权利要求1所述诱导芍药花粉胚胎发生的方法，其特征在于，步骤1）中，芍药花蕾大小在1.0～2.2cm之间。

3.如权利要求2所述诱导芍药花粉胚胎发生的方法，其特征在于，步骤1）具体为：采集花蕾后，装入自封袋中于3-5℃条件下低温预处理3～15 d，然后将经过低温预处理后的芍药花蕾剥去萼片，用流水冲洗，先用70-75%乙醇消毒，无菌水冲洗，再用0.5～2%次氯酸钠水溶液消毒，无菌水冲洗，无菌的镊子去掉花瓣，露出花药，用无菌解剖刀切下花药即可。