[发明专利]检测呼吸道相关病毒并分型的组合物、试剂盒、用途及方法

说明书

本发明涉及分子生物学检测领域，更具体地，涉及新型冠状病毒2019‑nCoV、甲型流感病毒、乙型流感病毒、副流感病毒、呼吸道腺病毒、呼吸道合胞病毒和偏肺病毒的检测；与此同时，还提供了包含所述组合物的试剂盒，所述组合物的用途，以及用于检测呼吸道相关病毒并分型的方法。本发明的组合物结合荧光探针法和熔解曲线法，能够在一管同时检测呼吸道相关病毒并进行分型，其成本低，通量高，耗时少，极大的提升了检测效率，并且操作简便，单管操作避免由于样本间交叉引起的假阳性和环境污染。

技术领域

本发明属于分子生物学检测领域，更具体的，更具体地，涉及新型冠状病毒2019-nCoV、甲型流感病毒、乙型流感病毒、副流感病毒、呼吸道腺病毒、呼吸道合胞病毒和偏肺病毒的检测并分型。

背景技术

呼吸系统感染性疾病大多数是临床上的常见病、多发病。引起呼吸道疾病的病原体种类很多，通过临床症状和常规的实验室检测很难鉴别确定所感染的病原体种类。呼吸道病毒可以通过空气传播，引起急性呼吸道病的的病原体具有感染力强、传播快、潜伏期短、发病急等特点，可引起广泛的急性上呼吸道和下呼吸道疾病，严重危害人类的健康。常见的呼吸道病毒包括：

2019新型冠状病毒（2019-nCoV），在2月11日国际病毒分类委员会将该病毒命名为SARS-CoV-2。冠状病毒是一个大型病毒家族，在此之前已知有6种可以感染到人类，如可引起感冒以及中东呼吸综合征（MERS）和严重急性呼吸综合征（SARS）等。新型冠状病毒SARS-CoV-2是以前从未在人体中发现的冠状病毒新毒株，该病毒在分类学上属于冠状病毒科（Coronaviridae）冠状病毒属（Coronavirus）中的β类型冠状病毒，具有囊膜和刺突细胞学特征基因组为线性单股正链的RNA（（＋）ssRNA）病毒。新型冠状病毒SARS-CoV-2从2019年12月发现至今，短短的3个多月，几乎在全世界爆发，在全球累积造成超过100万人感染，累积造成超过5万人死忙，引起了国际社会高度重视。

流行性感冒病毒（influenza virus），简称流感病毒，是一种造成人类及动物患流行性感冒的RNA病毒，人流感病毒分为甲（A）、乙（B）、丙（C）三型，是流行性感冒（流感）的病原体。禽流感（avian influenza; AI）是禽流行性感冒的简称，它是一种由甲型流感病毒的某种亚型（也称禽流感病毒）引起的传染性疾病。在分类学上，流感病毒属于正黏液病毒科（Orthomyxoviridae），流行性感冒病毒属（Influenza virus），它会造成急性上呼吸道感染，并借由空气迅速的传播，在世界各地常会有周期性的大流行，如发生在1918~1919年造成全球有二千万以上的人死亡的“西班牙流感”（Spanish Influenza）、发生于1957 年“亚洲流感”（Asian Influenza）、发生于1968年的“香港流感”（Hong Kong Influenza）和发生于1977年的“俄国流感”（Russian Influenza），以及发生于2013年的H7N9禽流感。

呼吸道合胞病毒（Respiratory Syncytial Virus，RSV）属副黏病毒科肺炎属的RNA病毒，临床研究表明，呼吸道合胞病毒是引起病毒性肺炎的最常见的病原，多见于三岁以下的婴幼儿，主要症状有高热、鼻炎、咽炎及喉炎，以后表现为细支气管炎及肺炎。少数病儿可并发中耳炎、胸膜炎及心肌炎等。成人和年长儿童感染后，主要表现为上呼吸道感染。

腺病毒（Adenoviruses，HAdv）属于腺病毒科（Adenoviridae），根据免疫学、生物学、生物化学特性不同，将其分为A～G 7个亚种，共有52个血清型，不同的血清型有不同的器官亲和性并引起相应的临床表现，对呼吸道、胃肠道、尿道和膀胱、眼、肝脏等均可感染。

副流感病毒(Human Parainfluenza viruse，HPIVs)是单链的RNA病毒，常常引起儿童下呼吸道感染，其致病性仅次于RSV。与RSV一样，人类副流感病毒可以造成反复发作的上呼吸道感染。它也能造成严重的反复感染的下呼吸道疾病，特别是在老年人中和有免疫缺陷人群中。