[发明专利]一种SOX6纳米抗体及其应用

说明书

本发明提供了一种SOX6纳米抗体及其应用，属于生物工程技术领域，所述SOX6纳米抗体具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。本发明提供的SOX6纳米抗体能够抑制黑色素瘤细胞的迁移。

技术领域

本发明属于生物工程技术领域，尤其涉及一种SOX6纳米抗体及其应用。

背景技术

骆驼科动物(羊驼、骆驼)和软骨鱼体内的一种天然缺失重链但仍然具有生物活性的特异性抗体称单域抗体，单域抗体的抗原结合位点(VHH)具有独立的抗原识别能力，独立表达的VHH又被称为纳米抗体。纳米抗体是一类具有体积小(纳米级)特点的新一代抗体，在各种组织中渗透能力强，在困难环境中稳定性好，在微生物系统中易于生产。纳米抗体实际上是具有结合能力的抗体的最小片段。纳米体的独特特性使其成为开发新的基于抗体治疗方法的合适候选对象。在降低生产成本方面纳米抗体结构简单易于体外表达，同时体外表达不易产生包涵体，生产工艺简单；同时纳米抗体的分子量小，结构简单，更有利于进行基因改造，纳米抗体人源化修饰等特性。在这方面，纳米抗体是许多研究人员和生物制药公司感兴趣的诊断和治疗应用。

黑色素瘤是由黑色素细胞癌化形成的一种最具侵袭性的发生于皮肤部位的恶性癌症。性别决定区域Y-box(SOX)家族由20个基因组成。这些基因编码转录因子和一个高流动性组(HMG)盒DNA结合域，这与性别决定区域(Sry)蛋白质非常相似。性别决定区域Y-box6(SOX6)属于大多数脊椎动物的SOXD组，还有SOX5和SOX13。SOX蛋白质的表达，作为转录调控因子，受到许多信号通路的严格控制。SOX6是在小鼠黑色素瘤细胞(B16)中表达，SOX6的下调并不影响B16细胞中的MITF水平。SOX6抑制细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)基因胰腺b细胞表达及e-球蛋白表达。SOX6可以促进黑色素瘤细胞的生长和增殖，制备SOX6纳米抗体，一方面可以成为利用分子成像技术研究SOX6作用机制的示踪工具，另一方面可以作为抑制黑素瘤生长的小分子工具。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种SOX6纳米抗体及其应用，本发明提供的SOX6纳米抗体能够抑制黑色素瘤细胞的迁移。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种SOX6纳米抗体，所述SOX6纳米抗体具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。

本发明还提供了上述技术方案所述的SOX6纳米抗体在制备抑制黑色素瘤细胞迁移的药物中的应用。

本发明提供了一种SOX6纳米抗体及其应用，所述SOX6纳米抗体具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。本发明提供的SOX6纳米抗体能够抑制黑色素瘤细胞的迁移。

附图说明

图1SOX6纳米抗体的SDS-PAGE及Western Blotting鉴定；

图2SOX6-VHH1在B16细胞中的定位；

图3添加SOX6-VHH1抑制B16黑素瘤细胞增殖迁移。

具体实施方式

本发明提供了一种SOX6纳米抗体，所述SOX6纳米抗体具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列，具体如下：

ESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTLGGWNIGWFRQAPGKEREGVLCISDSGESVYYLDSVKGRFTISSDYAENTVYLQMNSLKPEDTAIYFCAATYYRCSDYAPEFSSWGQGTQVTVSSAHHSEDPSSRPLWP。

在本发明中，所述SOX6纳米抗体的筛选方法，优选包括以下步骤：

1)将黑素瘤纳米抗体库进行第一轮淘洗，得到B16-SOX6-VHH1；

所述第一轮淘洗的SOX6蛋白的包被浓度为18～22μg/ml；