[发明专利]一种具有抗炎活性的新酚酸类化合物的制备方法及应用

说明书

本发明涉及一种新的酚酸类化合物在制备抗炎药物中的应用，发明还涉及从中药小花清风藤中提取、分离、纯化本化合物的制备方法。药理研究表明该新化合物具有显著抑制脂多糖(LPS)引起的小鼠巨噬细胞RAW246.7中NO、IL‑1、IL‑6和TNF‑α的水平，且多呈剂量依赖关系，表明本发明所述化合物具有明显的抗炎活性，可用于抗炎药物的制备。该制备方法简单易行，所得化合物纯度高，具有良好的经济效益和应用前景。

技术领域

本发明中医药技术领域，具体为从小花清风藤茎叶中提取分离酚酸类化合物及含有该化合物的中药提取物或混合物的制备方法和在制备抗炎药物中的用途。

背景技术

小花清风藤为清风藤科清风藤属藤本植物小花清风藤Sabia parviflora Wall.ex Roxb.的干燥茎和叶。贵州产小花清风藤为布依族、苗族的民间药，主要分布在贵州的兴义市、安龙县、册亨县、望谟县等地，其根茎、叶均可入药，有祛风除湿、消炎止痛的作用。

巨噬细胞是一种组织内的白血球，源自单核细胞，巨噬细胞和单核细胞皆为吞噬细胞，在机体内参与非特异性防卫和特异性防卫（细胞免疫），它们的主要功能是以固定细胞或游离细胞的形式对细胞残片及病原体进行噬菌作用（即吞噬以及消化），并激活淋巴球或其他免疫细胞，令其对病原体作出反应。巨噬细胞能够被多种炎症性因子所激活，如细胞因子、细菌脂多糖LPS、细胞外基质蛋白以及其他化学介质等。LPS是十分重要的致炎因子，它能够刺激体内的巨噬细胞合成和释放多种内源性活性因子，进而诱发炎症。利用LPS处理巨噬细胞是常用的体外炎症模型造模手段。

目前临床上常用的抗炎药主要有两类：非甾体抗炎药和甾体类抗炎药。虽然这两类抗炎药都有很好的临床应用效果，但长期大量使用均会产生一系列不良反应或副作用，如胃粘膜损伤、肝脏损伤、肾脏损害等，应用时间长亦可产生耐受性。因此寻找新的高效低毒的抗炎药物仍将是抗炎药物研究的热点领域。

中药是我国巨大的资源宝库，具有五千余年的临床应用经验，从中药中寻找先导化合物已成为近年来新药研究的重要来源，本发明应用现代分离技术与波谱分析方法相结合，从小花清风藤中分离出一种具有抗LPS致RAW264.7细胞炎症作用的酚酸类化合物，非常有望开发成高效低毒的抗炎新药候选药物。

发明内容

本发明的目的是提供一种新的酚酸类化合物及其在制备抗炎药物中的应用。用这种方法制备的该化合物具有抑制LPS诱导的RAW264.7细胞中NO、TNF-α、IL-1和IL-6的释放，显示良好的抗炎活性，可用于开发抗炎的相关药物。

实施本发明的技术方案如下：

一种具有抗炎活性的酚酸类化合物，其特征为：名称为：4-(3-羧基-4-羟基苯基)-2-甲基-2-丁烯酸，其结构式如下：

本发明提供的一种具有抗炎活性的酚酸类化合物其制备方法为：

S1将小花清风藤的干燥茎和叶用醇溶剂提取，小花清风藤茎叶与醇溶剂质量比为1：（8-15），得取浸膏；

S2将步骤S1所得浸膏，依次采用大孔树脂、反相柱色谱、制备型高效液相色谱进行分离，得到该化合物。

优选的，所述的提取方法包括冷浸法、渗漉法、微波提取法、超声提取法、回流提取法和连续回流提取法。

优选的，所述大孔树脂主要包括以下型号：HP-20、HP-21、SP850、SP700、SP207、AB-8、D101、XDA1、X-5、NKA-2、ADS-2。

优选的，所述大孔树脂色谱所用的洗脱液为丙酮、乙醇或甲醇中的一种溶剂或不同种溶剂的混合夜。