[发明专利]采用一测多评法测定当归丸(浓缩丸)成份的方法

权利要求书

1.采用一测多评法测定当归丸(浓缩丸)成份的方法，其特征在于，采用藁本内酯作为内参物进行一测多评，建立藁本内酯与阿魏酸、洋川芎内酯I之间的相对校正因子(f)，通过所述相对校正因子(f)计算阿魏酸、洋川芎内酯I的含量，采用液相色谱法进行测定，所述方法包括以下步骤：

步骤S1：色谱条件与系统适应性试验

色谱柱：C₁₈色谱柱；

流动相A：乙腈；

流动相B：0.1％甲酸；

梯度洗脱程序：

0～10min，流动相A：20％→58％；

10～25min，流动相A：58％→68％；

25～33min，流动相A：68％→68％；

33～40min，流动相A：68％→95％；

40～41min，流动相A：95％→20％；

41～50min，流动相A:20％→20％；

检测波长：280nm；

进样量：20μL；

柱温：30℃；

步骤S2：对照品溶液的制备

分别精密称取阿魏酸、洋川芎内酯I、藁本内酯，置于容量瓶中，分别加甲醇配制成含藁本内酯、洋川芎内酯I、阿魏酸的储备液，备用；分别吸取阿魏酸储备液，洋川芎内酯I储备液及藁本内酯储备液置于容量瓶中，加甲醇定容，摇匀，作为混合对照品溶液，备用；

步骤S3：供试品溶液的制备

精密称定一定量的当归丸(浓缩丸)样品粉末，置于容量瓶内，用甲醇溶液溶解并定容，然后滤过，获得当归丸(浓缩丸)的供试品溶液，备用；

步骤S4：相对校正因子f的计算

取步骤S2制备得到的混合对照品溶液，进样1、2、5、8、10、15、25μL，注入高效液相色谱仪，按步骤S1的色谱条件测定，记录各成份的峰面积，以藁本内酯为内参物，按公式f＝(W_k×A_m)/(W_m×A_k)(式中A_k为内参物峰面积，W_k为内参物的质量或浓度，A_m为被测组分m的峰面积，W_m为被测组分m的质量或浓度)，计算阿魏酸、洋川芎内酯I与内参物的f；

步骤S5：供试品中成份的测定

取步骤S3制备得到的供试品溶液注入高效液相色谱仪进行测定，获得色谱图，按以下公式分别计算出阿魏酸、洋川芎内酯I的质量或浓度；

所述公式为：W_m＝(W_k×A_m)/(f×A_k)，式中A_k内参物峰面积，W_k为内参物的质量或浓度；Am为被测组分的峰面积，Wm为被测组分的质量或浓度，f为阿魏酸、洋川芎内酯I的相对校正因子。

2.根据权利要求1所述的采用一测多评法测定当归丸(浓缩丸)成份的方法，其特征在于，

所述步骤S2中，分别精密称取阿魏酸、洋川芎内酯I、藁本内酯对照品7.82、4.34、21.8mg分别置25mL、25mL、20mL量瓶中，分别加甲醇配制成含藁本内酯、洋川芎内酯I、阿魏酸质量浓度分别为309.9、170.8、1090μg/mL的储备液，备用；分别吸取阿魏酸储备液0.1、0.1、0.1、0.2、0.4、0.3mL，洋川芎内酯I储备液0.25、0.25、0.25、0.5、1、0.75mL及藁本内酯储备液1、1、1、2、4、3mL，置50mL、25mL、10mL、10mL、10mL、5mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为混合对照品溶液，备用。

3.根据权利要求1所述的采用一测多评法测定当归丸(浓缩丸)成份的方法，其特征在于，

所述步骤S3中，取当归丸(浓缩丸)粉末1g，精密称定，置于150mL具塞锥形瓶中，精密加75％甲醇50mL，密塞，称定重量，超声处理20min，放冷，再称定重量，并用75％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即获得供试品溶液。