[发明专利]一种纳豆菌发酵菜用大豆等外品产纳豆激酶的方法

权利要求书

1.一种纳豆菌发酵菜用大豆产纳豆激酶的方法，其特征在于：包括：

（1）原料处理：菜用大豆经挑选、冲洗后称重，121℃高压蒸汽灭菌20min蒸熟；

（2）接种：将纳豆枯草芽孢杆菌菌液按照2%接种到菜用大豆中；豆子温度保持在48-52℃时倒入菌液；

（3）发酵：将倒入菌液的菜用大豆在37℃条件下，恒温发酵36小时；

（4）后熟：发酵完成后使其在4℃条件下，静置放置18小时，得纳豆产品；

（5）提取：盐溶后离心，取上清液，即为提取液；具体过程为：将纳豆产品冻干打粉后称重，加入10倍体积0.9%的生理盐水，在4℃下盐溶4h，10000r/min、4℃下离心15min，取上清，医用脱脂棉过滤除去脂肪组织及其他不溶物，得初提取液；

（6）分离纯化：硫酸铵盐析初步纯化，柱层析进一步纯化；所述盐析采用20%～60%硫酸铵饱和度，柱层析使用DEAE阴离子交换柱层析；

（7）干燥，得冻干粉。

2.根据权利要求1所述的纳豆菌发酵菜用大豆产纳豆激酶的方法，其特征在于：所述步骤（1）蒸熟后保持温度在45-55℃。

3.根据权利要求1所述的纳豆菌发酵菜用大豆产纳豆激酶的方法，其特征在于：所述步骤（7）的干燥为真空冷冻干燥。