[发明专利]一种时间分辨免疫分析检测系统与检测方法

说明书

一种用于检测待测样本的时间分辨免疫分析检测系统，其特征在于，所述待测样本包括具有至少一个零时生物标志物和至少一个延时生物标志物的采集样本和加入的分别用于检测所述至少一个零时生物标志物和至少一个延时生物标志物的至少一个零时均相免疫检测试剂与至少一个延时均相免疫检测试剂，所述时间分辨免疫检测系统包括：光源；时间门控模块；零时检测模块；延时检测模块；信号处理模块。

技术领域

本发明涉及时间分辨光学检测的技术领域，特别涉及一种时间分辨免疫分析检测系统与检测方法。

背景技术

当今感染性疾病仍然是人类面临的主要疾病，抗生素使得许多细菌性感染得到了控制，有效地降低了各种严重细菌感染性传染病的死亡率，但随之而来的抗生素滥用及耐药性问题也日趋严重。目前国家已经加大合理使用抗生素的控制力度，因此，对感染性染性疾病的早期、快速的鉴别诊断，动态监测对抗生素的合理使用及疾病的治疗具有重要的意义。

现有技术中，为确定患者患病而取其体液，并在体外检测体液中响应蛋白的含量是否符合标准，当其超出区间范围时，则判断其可能患有相关的疾病。但对于单一蛋白的检测很多情况下会有误诊情况，常是需要相关诊断或是多种对应蛋白检测结果相互佐证，用以提高诊断的准确率，减少误诊率直至确诊。但是现有相关检测的各种蛋白都是分别进行检测，使得检测时长较久，且增加检测量。

目前，C反应蛋白(CRP)、血清淀粉样蛋白A(SAA)、降钙素原(PCT)是感染性疾病的实验检查的主要依据，用于感染的诊断和鉴别，适用于发热待查、昏迷病人、老年病人、痴呆病人和儿童等患者。其中，在感染发生6h～8h后，CRP水平即开始升高，24h～48h达到高峰，高峰值可达正常的数百倍，在感染消除后其含量急骤下降，一周内可恢复正常，在病毒感染时无显著升高，这为疾病早期感染类型的鉴别提供了极其得要的依据。SAA在病毒和细菌感染中均升高，而病毒感染中CRP几乎不升高或升高不明显。因此，在CRP正常的病毒感染患者、非侵袭性或早期侵袭性细菌感染患者中，SAA是一个较为有用的指标，对于及时有效地治疗及各种并发症的预防有着重要的意义。因此，两者的联合检测可有效提高感染早期的诊断效率，提高临床灵敏度和临床特异性，并为病毒与细菌感染的鉴别及治疗方案的选择提供有用的参考信息。

目前，针对上述几种标记物的检测主要是免疫检测技术，即利用抗原与抗体特异性反应而建立的检测方法，包括免疫比浊法、免疫荧光法、化学发光法、时间分辨免疫荧光法、电化学发光法和免疫层析法等，可从人体血清和血浆中检测出上述蛋白。根据标记与否可归纳为标记免疫分析法和非标记免疫分析法两大类。由于需要有标记物，不可避免地存在需要将结合的抗原-抗体与过量的抗原或抗体的分离问题，因而标记免疫分析法根据分离与否又分为均相免疫分析法和非均相免疫分析法。非均相免疫分析法需要包埋、洗脱、分离等多步操作，设备昂贵，样本处理和分析过程繁琐，分析时间长，对专业程度要求高，操作易出现假阳性结果，造成漏检误检，不能满足快速检测和诊断的要求。均相发光免疫检测法是一种基于微球与微球、粒子与粒子、或分子与分子之间靠近的效应，并用于待测样本中目标分析物检测的方法，例如均相FRET、均相化学发光等。通过对光信号的强度检测，来判断实际检测样本中有无待测目标分析物或进一步得到目标分析物的浓度信息。均相发光免疫检测法有效避免了洗脱、分离等繁琐步骤，极大提高了分析效率和性价比，具有取代传统非均相免疫分析的潜力。

但是，均相发光免疫检测方法目前无法同时对单一样本中的多种抗原或抗体进行准确检测。一方面，如上述CRP、SAA、PCT的检测，由于体内含量的差异(CRP、SAA是mg级水平的物质，PCT是pg级水平的物质)，同时测量时低浓度目标物对应的弱信号会被高浓度目标物对应的强信号掩盖，因此一般需要分别测试一次才能完成所有项目的检测。另一方面，由于均相环境下多种颗粒之间的存在复杂的关联，如何有效的鉴别区分不同待测物的信号，也成为一个重要因素。

除此之外，目前均相免疫方法的检测样本基本上是血清或血浆样本，而无法检测全血样本。这是由于全血样本基质复杂，干扰因素多。这就必然需要样本的前处理，从而检测流程变得更复杂，耗时更长。