[发明专利]一种基于DNA条形码的枸杞快速鉴定方法在审
| 申请号： | 202010347886.2 | 申请日： | 2020-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN111394501A | 公开（公告）日： | 2020-07-10 |
| 发明（设计）人： | 石志刚;万如;王秀英;张曦燕;李云翔;杨利斌;王孝;马婷慧 | 申请（专利权）人： | 宁夏农林科学院枸杞工程技术研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6869 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 张倩 |
| 地址： | 750002 宁夏回族*** | 国省代码： | 宁夏;64 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 dna 条形码 枸杞 快速 鉴定 方法 | ||
1.一种基于DNA条形码的枸杞快速鉴定方法，其特征在于：所述DNA条形码为trnL-trnF条形码。
2.如权利要求1所述一种基于DNA条形码的枸杞快速鉴定方法，其特征在于：步骤如下：
1)从枸杞样品中提取基因组DNA；
2)以所述基因组DNA为模板，用如核苷酸序列SEQ ID NO.35和SEQ ID NO.36所示引物扩增trnL-trnF条形码序列片段，得到PCR产物；
3)对所述PCR扩增产物进行测序；
4)构建系统进化树，鉴定枸杞。
3.如权利要求2所述一种基于DNA条形码的枸杞快速鉴定方法，其特征在于：所述步骤1)中，提取样品的DNA采用试剂盒进行抽提。
4.如权利要求2所述一种基于DNA条形码的枸杞快速鉴定方法，其特征在于：所述步骤2)中，PCR扩增的反应体系为：①94℃预变性2min；②94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸2min，35次循环；③72℃保温10min；④4℃保存；PCR产物进行1.0％琼脂糖凝胶电泳检测后，在紫外凝胶成像系统下观察扩增结果。
5.由权利要求1-4任一所述方法构建的枸杞样本trnL-trnF条形码数据库，其特征在于：所述枸杞样本trnL-trnF条形码数据库包含trnL-trnF条形码34条，其核苷酸序列如SEQID NO.1-34所示。
6.权利要求5所述枸杞样本trnL-trnF条形码数据库在鉴定枸杞品种中的用途。
7.如权利要求6所述枸杞样本trnL-trnF条形码数据库在鉴定枸杞品种中的用途，其特征在于：步骤如下：
通过将待鉴定样品的trnL-trnF序列与所述枸杞样本trnL-trnF条形码数据库中的序列进行比对，以鉴定枸杞品种；所述待鉴定样品的trnL-trnF序列是经过基因组DNA提取、PCR扩增和对PCR扩增产物进行测序，获得相应序列。
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