[发明专利]一种玻璃化冷冻液及其生产方法在审
申请号: | 202010348072.0 | 申请日: | 2020-04-28 |
公开(公告)号: | CN111357739A | 公开(公告)日: | 2020-07-03 |
发明(设计)人: | 芮宝锋;刘宇;张路;孙颖;孙爱平 | 申请(专利权)人: | 爱科(天津)生物技术有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 天津合正知识产权代理有限公司 12229 | 代理人: | 马云云 |
地址: | 300303 天津市滨海新区自贸试验区(空港经*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 玻璃化 冷冻 及其 生产 方法 | ||
1.一种玻璃化冷冻液,其特征在于:包括玻璃化冷冻ES液和玻璃化冷冻VS液;
所述玻璃化冷冻ES液包括如下重量份的组分:非渗透性保护剂0.3-0.7份,渗透性保护剂10-20份,离子基础剂0.2-1.0份,能量基础剂0.01-1份,营养剂0.001-0.1份,缓冲剂0.1-1.0份,指示剂0.0001-0.1份,pH调节剂0.001-1.0份,抗菌剂0.0001-0.1份和纯化水80.0-90.0份;
所述玻璃化冷冻VS液包括如下重量份的组分:非渗透性保护剂5.0-10.0份,渗透性保护剂20.0-40.0份,离子基础剂0.2-1.0份,能量基础剂0.01-1份,营养剂0.001-0.1份,缓冲剂0.1-1.0份,指示剂0.0001-0.1份,pH调节剂0.001-1.0份,抗菌剂0.0001-0.1份和纯化水55.0-70.0份。
2.根据权利要求1所述的玻璃化冷冻液,其特征在于:所述非渗透性保护剂为蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、葡聚糖、羟乙基淀粉、半乳糖或人血清白蛋白中的一种或两种以上;优选地,所述非渗透性保护剂为蔗糖和/或人血清白蛋白;
优选地,所述玻璃化冷冻ES液的非渗透性保护剂包括人血清白蛋白0.3-0.7份;
优选地,所述玻璃化冷冻VS液的非渗透性保护剂包括人血清白蛋白0.3-0.7份,蔗糖4.0-9.0份。
3.根据权利要求1所述的玻璃化冷冻液,其特征在于:所述渗透性保护剂为二甲基亚砜、乙酰胺、甲醇、乙二醇、丙二醇、丁二醇、丙三醇中的一种或两种以上;优选地,所述渗透性保护剂为二甲基亚砜和/或乙二醇;
优选地,所述玻璃化冷冻ES液的渗透性保护剂包括二甲基亚砜5.0-10.0份,乙二醇5.0-10.0份;
优选地,所述玻璃化冷冻VS液的渗透性保护剂包括二甲基亚砜10.0-20.0份,乙二醇10.0-20.0份。
4.根据权利要求1所述的玻璃化冷冻液,其特征在于:所述离子基础剂包括第一基础离子剂、第二基础离子剂、第三基础离子剂和第四基础离子剂;
所述第一基础离子剂为氯化钠、硫酸钠中的一种或两种,优选地,第一基础离子剂为氯化钠;
所述第二基础离子剂为氯化钾、硫酸钾中的一种或两种,优选地,第二基础离子剂为氯化钾;
所述第三基础离子剂为氯化镁、硫酸镁中的一种或两种,优选地,第三基础离子剂为硫酸镁;
所述第四基础离子剂为氯化钙;
优选地,所述玻璃化冷冻ES液的离子基础剂包括氯化钠0.1-0.6份,氯化钾0.02-0.1份,氯化钙0.01-0.1份,硫酸镁0.001-0.1份;
优选地,所述玻璃化冷冻VS液的离子基础剂包括氯化钠0.1-0.6份,氯化钾0.02-0.1份,氯化钙0.01-0.1份,硫酸镁0.001-0.1份。
5.根据权利要求1所述的玻璃化冷冻液,其特征在于:所述能量基础剂为葡萄糖、乳酸钠和丙酮酸钠中的一种或两种以上,优选地,所述能量基础剂为葡萄糖、乳酸钠和丙酮酸钠;
优选地,所述玻璃化冷冻ES液的能量基础剂包括葡萄糖0.01-0.05份,乳酸钠0.05-0.2份,丙酮酸钠0.001-0.01份;
优选地,所述玻璃化冷冻VS液的能量基础剂包括葡萄糖0.01-0.05份,乳酸钠0.05-0.2份,丙酮酸钠0.001-0.01份。
6.根据权利要求1所述的玻璃化冷冻液,其特征在于:所述缓冲剂为HEPES、MOPS、磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、磷酸钾、磷酸钠中的一种或两种以上,优选地,所述缓冲剂为HEPES和磷酸二氢钾;
优选地,所述玻璃化冷冻ES液的缓冲剂包括HEPES0.2-0.6份,磷酸二氢钾0.001-0.1份;
优选地,所述玻璃化冷冻VS液的缓冲剂包括HEPES0.2-0.6份,磷酸二氢钾0.001-0.1份。
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