[发明专利]一种含有人脐带间充质干细胞培养上清的精华液

说明书

本发明提供一种人脐带间充质干细胞培养上清，是使用添加了1～10％的血小板裂解物的α‑MEM培养基对人脐带间充质干细胞进行培养，收集P3‑P6代的细胞培养上清制备的。本发明所提供的人脐带间充质干细胞培养上清液用于制备化妆品；所述的化妆品，其一种为精华液。本发明制备的人脐带间充质干细胞培养上清包含多种人体细胞因子，可以直接渗入肌肤，作用于组织细胞，促进皮肤干细胞的修复和再生，从根本上改善皮肤老化。

技术领域

本发明属于化妆品制备技术领域，尤其涉及一种含有人脐带间充质干细胞培养上清的精华液。

背景技术

随着生活水平的提高与科技的进步，以往的美白、保湿等基本功能已不能满足人们对化妆品的需求，抗衰老逐渐成为大家关心的方面。在皮肤老化的过程中，活性氧是皮肤老化的重要诱因，且内源性老化和外源性老化是同时作用的。内源性老化主要是随着年龄的增长，氧化及糖化的蛋白质逐渐累积，使得真皮中胶原蛋白和弹性蛋白损失，皮肤变薄，角质形成细胞变性。外源性老化则是因为紫外线损伤、环境损害、发炎等，导致表皮组织的恶化和损伤。

间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)是来源于早期中胚层的成体干细胞，具有高度自我更新能力和多向分化潜能，是造血微环境中的一种重要的细胞成分，可以向多种组织如骨、软骨、肌肉、韧带、肌腱、脂肪及基质细胞增殖分化，而且免疫原性弱，是组织工程立项的种子细胞来源。人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymalstem cells，hUC-MSCs)相比于其他来源的MSCs，还具有提取方便，含量丰富，细胞纯净，免疫原性更低，细胞原始、分化能力更强，无伦理限制等优势，可为实验和临床提供充足的细胞来源，具有广阔的临床应用前景。研究发现hUC-MSCs的培养上清中含有多种细胞因子，如血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)，肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)，碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growthfactor,b-FGF)，表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)，粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)，转化生长因子β(transforming growth factor-β,TGF-β)，神经生长因子(nerve growth factor,NGF)等。而这些因子对于皮肤伤口的愈合及细胞外基质的重建，胶原和弹性蛋白的稳定生产及分布具有重要作用。

目前市场上传统的精华液主要是利用外源性物质，如通过植物成分提取或精细化工制作工艺加工而成的，虽然对肌肤能产生短暂的改善效果，但并未从根本上改变皮肤的衰老问题。尽管现有的专利中有将间充质干细胞培养上清应用于化妆品中，但仅仅是对干细胞进行常规培养，收集培养上清，冷冻干燥或者直接用于化妆品中，含有的细胞因子含量较少，需要额外添加VEGF等生长因子，且生长因子的稳定性并不能保证。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的是提供了一种含有人脐带间充质干细胞培养上清的精华液，促进皮肤损伤修复以及抗氧化，且不需要额外添加生长因子，可稳定保存所含生长因子。

本发明首先提供一种人脐带间充质干细胞培养上清，是使用添加了1～10％的血小板裂解物的α-MEM培养基对人脐带间充质干细胞进行培养，收集P3-P6代的细胞培养上清制备的。

其中血小板裂解物的添加浓度为5％。

本发明所提供的人脐带间充质干细胞培养上清液用于制备化妆品；

所述的化妆品，其一种为精华液；

本发明另一个方面还提供一种化妆品精华液，其中使用上述的人脐带间充质干细胞培养上清液；

所述的精华液，其中还添加有鼠尾藻多糖；