[发明专利]一种多硫酸化硫酸软骨素的制备方法在审
申请号: | 202010349133.5 | 申请日: | 2020-04-28 |
公开(公告)号: | CN111285943A | 公开(公告)日: | 2020-06-16 |
发明(设计)人: | 田景全;田丽文;赵冰;孙健;赵涛 | 申请(专利权)人: | 山东冰文生物技术有限公司 |
主分类号: | C08B37/08 | 分类号: | C08B37/08 |
代理公司: | 北京汇信合知识产权代理有限公司 11335 | 代理人: | 徐荣荣 |
地址: | 257000 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 硫酸 软骨素 制备 方法 | ||
1.一种多硫酸化硫酸软骨素的制备方法,其特征在于,该种多硫酸化硫酸软骨素的制备方法具体包括以下步骤:
步骤一:软骨准备并进行预处理,将新鲜的软骨用不锈钢剃刀除去脂肪以及结缔组织,用清水冲洗,可用滤筛去除碎屑,再置于通风干燥处进行晾干,置于30分钟-45分钟自然晾干即可,再通过粉碎机粉碎,粉碎后可置于不锈钢盆,并置于冷库内进行暂存,用时取出即可;
步骤二:制备多硫酸化硫酸软骨素;
步骤三:加工提取多硫酸化硫酸软骨素;
步骤四:酶解提取多硫酸化硫酸软骨素,将滤液取出并置于酶解罐中,搅拌下加入1:1盐酸调节pH值,加热至50-60℃,加入合理范围内质量的胰酶酶解6-8h,取酶解液;
步骤五:吸附沉淀酶解后的多硫酸化硫酸软骨素;
步骤六:冻制加工多硫酸化硫酸软骨素,将多硫酸化硫酸软骨素沉淀加入10倍硫酸软骨素投料质量的纯化水溶解,调节pH值,后经0.45-0.55µm的膜过滤后冻干,得到多硫酸化硫酸软骨素冻干品。
2.如权利要求1所述的多硫酸化硫酸软骨素的制备方法,其特征在于,在步骤二中,所述的制备多硫酸化硫酸软骨素,具体操作包括以下步骤:
第一步:搅拌处理,将取出的软骨粉末置于搅拌桶内,再通过搅拌器进行搅拌;
第二步:降解反应,搅拌状态下,将30%-45%质量百分比浓度的硫酸软骨素甲酰胺溶液与氯磺酸和甲酰胺混合液混合后,在35-40℃下搅拌5-7小时,再升温至75-80℃降解后搅拌6-8小时,然后加入反应液4-5体积倍量的97%乙醇搅拌后静置;
第三步:分离处杂,经固液分离后得到多硫酸化硫酸软骨素沉淀,搅拌器可通过PLC进行控制,沉淀后的杂质废液取出,可通过处理器进行处理排放。
3.如权利要求1所述的多硫酸化硫酸软骨素的制备方法,其特征在于,在步骤三中,所述的加工提取多硫酸化硫酸软骨素,具体操作包括以下步骤:
第一步:蒸煮搅拌,对多硫酸化硫酸软骨素进行煮沸,可通过PLC控制PTC加热器进行蒸煮操作,蒸煮合理范围内时间后,加入4倍量的3%氢氧化钠溶液搅拌提取24-26h;
第二步:过滤提取,用纱布过滤,滤渣再用2倍量的3%氢氧化钠溶液搅拌提取12-18h,过滤;
第三步:弃渣处理,将过滤后形成的提取液,弃去滤渣,滤渣可通过步骤二中的处理器进行处理加工。
4.如权利要求1所述的多硫酸化硫酸软骨素的制备方法,其特征在于,在步骤五中,所述的吸附沉淀酶解后的多硫酸化硫酸软骨素,具体操作包括以下步骤:
第一步:吸附沉淀,将酶解液置于吸附沉淀罐内,并调整pH值6.8-7.2,加入6-8kg质量的白土,并不断通过搅拌器进行搅拌,搅拌5-8h后,再加入1%-2%的活性炭块进行吸附1-3h,再通过过滤网筛进行过滤除杂;
第二步:滤杂回收,将滤渣通过步骤二中的处理器进行处理,最后形成多硫酸化硫酸软骨素,可取出置于室温内,再通过加入90%以上的乙醇进行搅拌,搅拌45-50min后,静置1-2h,取出上清液,回收乙醇,将下层沉淀脱水干燥得到多硫酸化硫酸软骨素,准备最后的工序。
5.如权利要求1所述的多硫酸化硫酸软骨素的制备方法,其特征在于,在步骤一中,所述的软骨采用牛骨、马骨或者羊骨的一种,所述的冷库温度设置为0℃至-3℃。
6.如权利要求2所述的多硫酸化硫酸软骨素的制备方法,其特征在于,在步骤二中,所述的第二步中的氯磺酸和甲酰胺混合液中氯磺酸与硫酸软骨素的质量比为1.8-1.9:1,甲酰胺与硫酸软骨素的质量比为5-6:1。
7.如权利要求2所述的多硫酸化硫酸软骨素的制备方法,其特征在于,在步骤二中,所述的第三步中的处理器通过活性炭吸附网筛,不锈钢过滤网以及不锈钢网筒组成,所述的不锈钢过滤网采用两个,并且均通过螺钉安装在不锈钢网筒内部左右两侧,并且所述的活性炭吸附网筛位于不锈钢过滤网之间,可使得不锈钢网筒与搅拌桶下部出口处相连接,可通过活性炭吸附网筛和不锈钢过滤网过滤处理沉淀后的杂质废液。
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