[发明专利]一种防治植物疫霉病的复合菌发酵产物的制备方法、复合菌发酵产物及其应用

说明书

本发明属于生物防治技术领域，具体涉及一种防治植物疫霉病的复合菌发酵产物的制备方法、复合菌发酵产物及其应用。所述制备方法包括：(1)将海洋木霉进行孢子培养，将得到的孢子接种到震荡培养基中进行震荡培养，得到海洋木霉震荡培养物；(2)将枯草芽孢杆菌进行种子培养，得到的种子培养物接种到震荡培养基中进行震荡培养，得到枯草芽孢杆菌震荡培养物，将所述枯草芽孢杆菌震荡培养物与步骤(1)得到的海洋木霉震荡培养物混合后进行共发酵，得到共发酵物，将所述共发酵物离心、过滤，得到复合菌发酵产物。本发明制备的复合菌发酵产物显著降低植物疫霉的生长，相对于单个菌种的防治效果，对植物真菌病害具有较好的防治效果。

技术领域

本发明属于生物防治技术领域，具体涉及一种防治植物疫霉病的复合菌发酵产物的制备方法、复合菌发酵产物及其应用。

背景技术

疫霉属卵菌是重要的植物病原菌，几乎侵染所有双子叶植物和部分禾本科植物，据统计，每年导致全球经济损失接近500亿美元。由于寄主范围广、传播途径多，加上病原菌能形成卵孢子等休眠体在土壤中长期存活，迄今，疫霉病害防治仍是世界性难题。目前生产上防治药剂主要为特异性地抑制RNA聚合酶Ⅰ的甲霜灵为主，药剂使用年限长、品种相对单一，极易造成农药残留、环境污染及病原抗药性产生，亟需寻找替代药剂。

我国在微生物生防资源利用与生物农药研发部分已居国际先进水平，但相比欧美等发达国家研发力度与产业化水平还有差距。菌株来源单一、防效差、制剂加工落后等是制约微生物农药发展的主要瓶颈问题。目前微生物农药选用菌株多以单一菌株或少数菌株复配为主，防病机制单一、防治效果偏低且不稳定，选用不同来源和作用机制菌株搭配使用成为微生物农药重要发展方向。在微生物发酵方面，多以菌株单独发酵或复配为主，近年兴起的共培养技术在生防领域尚未见报道。

发明内容

本发明提供了一种防治植物疫霉病的复合菌发酵产物的制备方法、复合菌发酵产物及其应用，经该方法制备的发酵产物能够显著降低植物疫霉的活性，对植物真菌病害具有较好的防治效果。

为解决上述技术问题，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供一种防治植物疫霉病的复合菌发酵产物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将海洋木霉进行孢子培养，将得到的孢子接种到震荡培养基中进行震荡培养，得到海洋木霉震荡培养物；

(2)将枯草芽孢杆菌进行种子培养，得到的种子培养物接种到震荡培养基中进行震荡培养，得到枯草芽孢杆菌震荡培养物，将所述枯草芽孢杆菌震荡培养物与步骤(1)得到的海洋木霉震荡培养物混合后进行共发酵，得到共发酵物，将所述共发酵物离心过滤，得到复合菌发酵产物。

优选的，所述海洋木霉包括海洋棘孢木霉或海洋里氏木霉。

优选的，所述海洋棘孢木霉包括海洋棘孢木霉HG1，所述海洋棘孢木霉 HG1的保藏编号为CGMCC NO.19276。

优选的，所述海洋里氏木霉包括海洋里氏木霉HT6或海洋里氏木霉 HT7，所述海洋里氏木霉HT6的保藏编号为CGMCC NO.19274，所述海洋里氏木霉HT7的保藏编号为CGMCCNO.19275。

优选的，所述枯草芽孢杆菌包括枯草芽孢杆菌Tpb55，所述枯草芽孢杆菌Tpb55的保藏编号为CGMCC NO.2843。

优选的，所述步骤(1)震荡培养的条件包括：所述震荡培养的温度为 25～33℃，所述震荡培养的转速为160～200rpm，所述震荡培养的时间为 48～72h；所述孢子培养物中海洋木霉的孢子浓度在1×10⁵cfu/ml以上。

优选的，所述步骤(2)震荡培养的条件包括：所述震荡培养的温度为 25～33℃，所述震荡培养的转速为160～200rpm，所述震荡培养的时间为 12～24h；所述种子培养物中枯草芽孢杆菌的活菌浓度在1×10⁵cfu/ml以上。