[发明专利]UCNs表面修饰DNA的方法在审
| 申请号： | 202010352372.6 | 申请日： | 2020-04-28 |
| 公开（公告）号： | CN111518539A | 公开（公告）日： | 2020-08-11 |
| 发明（设计）人： | 郑斌;郭明明;明东;甘霖 | 申请（专利权）人： | 天津大学 |
| 主分类号： | C09K11/02 | 分类号： | C09K11/02;B82Y30/00 |
| 代理公司： | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人： | 程小艳 |
| 地址： | 300072*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | ucns 表面 修饰 dna 方法 | ||
【权利要求书】：
1.UCNs表面修饰DNA的方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)使用磺基-SMCC交联剂，通过氨基-硫醇化的DNA修饰为AEP稳定的UCNs；
2)首先，通过在pH＝5.0下用TCEP(50×)处理1h裂解硫醇化DNA的二硫键；
3)用Illustra NAP-5柱对DNA脱盐；
4)将1mg AEP稳定的UCNs溶解在800μL 10m MHEPES缓冲液中，并将所得混合物超声处理30min；
5)通过超声将0.4mg磺基SMCC溶于200μL10mM HEPES缓冲液中，然后与1mg AEP稳定的UCNs溶液充分混合；
6)在25℃混合2h后，通过离心收集氨基活化的UCNs，用15mM HEPES缓冲液洗涤三次，然后再分散在200μL10mM HEPES缓冲液中；
7)将20μL 100μM巯基化的DNA和780μL 10μM HEPES添加到制备的UCNs溶液中，使最终得到1.5mL体积。在黑暗中25℃过夜；
8)最后离心10min收集DNA修饰的UCNs。
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